[发明专利]利用YPB肽段抑制乳腺癌细胞增殖及肿瘤生长的方法和应用

说明书

利用YPB肽段抑制乳腺癌细胞增殖及肿瘤生长的方法和应用，涉及利用YPB肽段抑制乳腺癌细胞增殖及肿瘤生长的方法和应用。本发明的目的是为了提供能够通过阻遏YY1和EZH2的结合进而抑制乳腺癌细胞增殖及肿瘤生长的物质。本发明通过对蛋白分子间相互作用的研究，鉴定了YY1和EZH2两个促癌蛋白之间的相互结合区域，并通过YY1在EZH2蛋白分子上结合区域的序列合成了含有YPB的FITC‑TAT‑GGG‑YPB多肽，该多肽能够通过干扰YY1和EZH2两个分子的结合，阻遏它们的功能，进而抑制乳腺癌细胞的增殖以及裸鼠中移植瘤的生长。本发明可获得利用YPB肽段抑制乳腺癌细胞增殖及肿瘤生长的方法和应用。

技术领域

本发明涉及利用YPB肽段抑制乳腺癌细胞增殖及肿瘤生长的方法和应用。

背景技术

EZH2(Enhancer of zeste homolog 2)是一种组蛋白甲基转移酶，催化组蛋白H3上的第27位赖氨酸(即H3K27)的三甲基化修饰，这一修饰是基因沉默的重要标志[Kim andRoberts 2016,Nat Med]。EZH2是polycomb group(PcG)蛋白家族中的一员，其功能为通过调节染色质重塑来抑制基因表达。EZH2还是polycomb repressive complex 2(PRC2，抑制复合体2)中重要的功能组成部分，负责维持基因表达的抑制。PcG蛋白参与表观遗传修饰。从功能上，PcG蛋白可以分为PRC1和PRC2两个核心蛋白复合体，二者能够抑制数百种基因，包括大量的转录调节因子。由于EZH2本身没有DNA结合区域，因此需要被YY1等分子招募到靶基因上，以行使其在组蛋白H3K27位点上的甲基转移酶功能[Pan et al.2013,EMBO J]。除了调节正常的生长发育之外，EZH2在很多形成实体瘤的癌细胞中过量表达，并与癌症的不良临床预后呈正相关性。因此，EZH2在实体瘤中被认为是一个原癌基因或促癌基因。在乳腺癌中，EZH2也存在高表达，并通过多个信号通道促进肿瘤细胞的增殖和癌转移，因而被认为是一个癌症治疗中潜在的靶基因。目前，已经有多种EZH2抑制剂被用于抑制肿瘤细胞的增殖，例如GSK343和EPZ005687[Kim and Roberts 2016,Nat Med]。

YY1最早是由Shi等人[Shi et al.1991,Cell]作为一个含有414个氨基酸的DNA结合蛋白而被发现的。作为一个转录因子，YY1具有“阴阳(Yin Yang)”的特性，即可以抑制或激活靶基因的表达。YY1是一个重要的表观遗传学调节因子，其所调节的基因具有多种生物学功能，包括细胞生长，分化以及胚胎的发育。YY1可以结合多个参与表观遗传学的重要蛋白因子，包括调节组蛋白乙酰化的p300/CBP、PCAF、HDACs，组蛋白甲基化的EZH2、EZH11、PRMT4，DNA甲基化的DNMTs(见综述[Zhang et al.2011,Crit Rev Oncog])。

Yin Yang 1(YY1)是一个多功能蛋白，具有促进肿瘤细胞增殖的活性。如图1所示，YY1蛋白分子上，有一个OPB(Onco-protein Binding)区域，可以结合多个促进癌症发生及发展的蛋白(癌蛋白)，包括AKT,MDM2,E1A和EZH2[Zhang et al.2016,J Mol Cell Biol]。

在早期的研究中，人们对于YY1在癌症发生中的作用一直不够明确。直到2004年，我们发现了YY1可以负调节抑癌基因p53[Sui et al.2004,Cell]，其促癌或刺激细胞生长的功能才被意识到。值得注意的是，YY1的这一功能并不依赖于其调节转录的活性，这也就扩展了YY1的功能及调节范围。与此同时，YY1对原癌基因EZH2功能的调节及促进作用也被发现。这些进一步加强了YY1的原癌基因地位，也增强了其作为癌症治疗中靶基因的可能性。有研究已经证实EZH2在功能上依赖于YY1的OPB区域。YY1所调节的EZH2功能对肿瘤的形成和发展过程中的基因异常表达、抑制细胞凋亡和促进细胞增殖及生存等方面起到了重要的作用。因此，阻遏YY1与EZH2的相互作用将可能在多个信号通路上抑制肿瘤细胞的发展，以此分子原理为基础的抑制剂将可能成为有效的抗癌药物。

发明内容