[发明专利]一种心血管疾病用药基因检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，包括PCR扩增试剂和心血管类药物相关靶基因突变位点的扩增引物组，所述心血管类药物相关靶基因突变位点包括如下7种基因12个突变位点：CYP2C9基因c.430CT和a.1075AC位点、CYP2D6基因c.100CT和c.2850T位点、CYP2C19基因的c.681GA和c.636GA以及c-806CT位点、VKORC1基因c.1173CT和c.1639GA位点、ADRB1基因c.1165GC位点、AGTR1基因a.1166AC位点，以及CYP4F2基因c.1347T位点。

2.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述CYP2C9基因c.430CT和a.1075AC位点的扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.4所示。

3.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述CYP2D6基因c.100CT和c.2850T位点的扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.5至SEQ ID NO.8所示。

4.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述CYP2C19基因的c.681GA和c.636GA以及c-806CT位点的扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.9至SEQ ID NO.14所示。

5.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述VKORC1基因c.1173CT和c.1639GA位点的扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.15至SEQ ID NO.18所示。

6.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述ADRB1基因c.1165GC位点的扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.19至SEQ ID NO.20所示。

7.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述AGTR1基因a.1166AC位点的扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.21至SEQ ID NO.22所示。

8.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述CYP4F2基因c.1347T位点扩增引物组的序列如序列SEQ ID NO.23至SEQ ID NO.24所示。

9.根据权利要求1所述的心血管疾病用药基因检测试剂盒，其特征在于，所述PCR扩增试剂包含25mM 10×PCR缓冲液、30mM MgCl₂、20mM dNTP Mix、0.5μM引物Mix、5U/μLUNG酶、5U/μL d ATP酶和5U/μl PCR Tap酶。

10.利用权利要求1至9任一权利要求所述的检测试剂盒进行心血管疾病用药基因的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、制备待测样本基因组DNA；

S2、以提取的基因组DNA为模板，利用权利要求1至9任一权利要求所述的检测试剂盒的配制PCR反应体系进行多重PCR扩增反应；

S3、PCR产物纯化及消化：用外切酶和碱性磷酸酶消化PCR产物中多余的dNTP、引物扩增产物；

S4、产物质谱检测：反应结束后使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱，根据自带的Typer软件分析检测位点的基因型。