[发明专利]一种心血管疾病用药基因检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种心血管疾病用药基因检测试剂盒及检测方法，心血管疾病用药基因检测试剂盒包括PCR扩增试剂和心血管类药物相关靶基因突变位点的扩增引物组，所述心血管类药物相关靶基因突变位点包括CYP2C9、CYP2D6、CYP2C19、VKORC1、ADRB1、AGTR1、CYP4F2、7种基因的12个突变位点。本发明通过进行多重PCR扩增，再结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱，实现了12个多态性位点的同时检测，样品提取DNA后可直接扩增，处理时间短，测通量高，检测位点多，同时也能避免患者进行多次重复检测，具有极大的临床应用价值。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，更具体地，涉及一种心血管疾病用药基因检测试剂盒及检测方法。

背景技术

心脑血管疾病一般指心脑血管疾病，是心脏血管和脑血管疾病的统称，泛指由于高脂血症、血液黏稠、动脉粥样硬化、高血压等所导致的心脏、大脑及全身组织发生的缺血性或出血性疾病。心脑血管疾病是一种严重威胁人类，特别是50岁以上中老年人健康的常见病，具有高患病率、高致残率和高死亡率的特点，即使应用目前最先进、完善的治疗手段，仍可有50％以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理，全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，其发病率和死亡率已超过肿瘤而跃居第一。《中国心血管病报告2019》报告表明，目前，我国心血管病死亡占城乡居民总死亡原因的首位，农村为45.5％，城市为43.16％。也就是说，每5例死亡中就有2例死于心血管病。

心血管疾病临床常用药物包括华法林、氯吡格雷、阿司匹林、氯沙坦、硝酸甘油等。然而，由于个体差异的存在，同样的药物对不同的人具有非常明显的药效差异，这主要是由于遗传背景不同，而遗传因素是影响药物代谢、吸收及排泄的重要因素。例如，COX-1、GPⅡb/Ⅲa、CYP2C19、CYP2C9、VKORC1、ALDH2等6个基因在药物转运、代谢和无效成分排出等过程中起到重要的作用，而且在关键位置的单核苷酸多态性会导致这些基因丧失功能。通过对各种心血管类药物靶位基因多态性的检测来决定药物的选择或使用剂量是至关重要的协助临床精准用药手段。

目前，在心血管药物相关基因分型检测方面，国内市场主要针对CIPC指南中的基因、FDA明确规定的基因以及国家卫计委指南中的部分基因进行的检测，主要包括CYP2C19、CYP2C9、APOE、SLCO1B1、VKORC1等基因。而用药相关基因分型检测的技术手段，目前有很多，如直接测序法、基因芯片法、高通量测序等，然而这些检测方法均存在各种不同程度的缺陷，如操作过程繁琐、检测设备贵、成本高、重复性差、结果不易判读、检测位点少等，不适合临床推广。因此，急需一种快速、稳定、价格低廉且操作简便的检测方法，既能方便检测技术人员，同时也能避免患者进行多次重复检测。

发明内容

本发明旨在克服上述现有技术的至少一种缺陷，提供一种心血管疾病用药基因检测试剂盒，所述检测试剂盒可同时检测多种心血管类药物相关基因，检测通量高，检测位点多，，同时也能避免患者进行多次重复检测，具有极大的临床应用价值。

本发明的另一目的在于提供一种心血管疾病用药基因的检测方法，所述检测方法快速、稳定、价格低廉且操作简便。

本发明采取的技术方案如下：

一种心血管疾病用药基因检测试剂盒，包括PCR扩增试剂和心血管类药物相关靶基因突变位点的扩增引物组，所述心血管类药物相关靶基因突变位点包括如下7种基因12个突变位点：CYP2C9基因c.430CT和a.1075AC位点、CYP2D6基因c.100CT和c.2850T位点、CYP2C19基因的c.681GA和c.636GA以及c-806CT位点、VKORC1基因c.1173CT和c.1639GA位点、ADRB1基因c.1165GC位点、AGTR1基因a.1166AC位点，以及CYP4F2基因c.1347T位点。