[发明专利]一种脆性X综合征检测试剂盒

权利要求书

1.一种脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，包括引物组、PCR反应液、Taq酶、脆性X综合征标准品、阴性对照样品；所述引物组包括用于扩增包含CGG重复区域、5’侧翼区和3’侧翼区的区域的第一引物对，用于扩增CGG重复区域和5’侧翼区的区域的第一引物组合，以及用于扩增CGG重复区域和3’侧翼区的区域的第二引物组合。

2.根据权利要求1所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，所述第一引物对包括中上游引物FMR1-F1序列包含SEQ ID NO：1，下游引物FMR1-R1序列包含SEQ ID NO：2；所述SEQ ID NO：1为AGCTTCGGCTACAGTCAGGCGCTCAG；SEQ ID NO：2为AGCTTCTCCATCGGCTCTTCAGC。

3.根据权利要求1所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，第一引物组合中针对CGG重复序列的上游引物为FMR1-T1和FMR1-CGG7，FMR1-T1序列包含SEQ ID NO：3，FMR1-CGG7序列包含SEQ ID NO：4；下游引物为FMR1-R2，其序列包含SEQ ID NO：5；其中SEQ IDNO：3为CAGGAAACAGCTATGATTGTGCCG；其中SEQ ID NO：4为CAGGATTCAGCTATGACCGTGCCGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGG；SEQ ID NO：5为ATGGCTATGCGTAGTTTCTGGGTC。

4.根据权利要求1所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，第二引物组合中针对CCG重复序列的上游引物为FMR1-F2，其序列包含SEQ ID NO：6；下游引物为FMR1-T2和FMR1-CCG7，FMR1-T2序列包含SEQ ID NO：7，FMR1-CCG7序列包含SEQ ID NO：8；其中SEQ ID NO：6为TTCGGTGGCACTTCCGGTGGA；SEQ ID NO：7为ATTGCTATGCCTAGGGTCTGGGTC；其中SEQ ID NO：8为：ATTTCTAGGCGTAGTGTCTCCGTCTTGCCGCCGCCGCCGCCGCCG。

5.根据权利要求1所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括dNTPs、PCR缓冲液和水，所述PCR缓冲液包含8mM Tris-HCl、160mM KCl、1mM MgCl₂。

6.根据权利要求5所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，每微升的PCR反应液中加入2单位的Taq酶。

7.根据权利要求6所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，所述Taq酶为L-Taq酶。

8.根据权利要求5所述的脆性X综合征检测试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液的扩增的条件设置为：97℃下预变性5min；98℃下变性40s，65℃下退火35s，72℃下延伸4min，10个循环；98℃下变性40s，65℃下退火35s，72℃下延伸5min±25s/cycle，25个循环；最后在72℃下延伸10min。