[发明专利]一种饲料用益生菌的制备方法

权利要求书

1.一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

步骤一：配置培养基：豆渣3-5％、糖蜜2-6％、麸皮40-50％、葡萄糖0.5-1％、蛋白胨0.5-1％、玉米浆1-2.5％、尿素0.1-0.3％、酵母浸粉0.2-0.5％、磷酸氢二钾0.1-0.5％、磷酸二氢钾0.1-0.5％、碳酸钙1-2％、硫酸镁0.02％-1％、硫酸锰0.02％-1％、余量为水，将上述原料混合均匀，灭菌；

步骤二：接种发酵剂：取发酵剂菌液进行接种，接种量质量分数为3％-7％；

步骤三：发酵培养：在32-37℃，pH为6.5-7.2，每隔6h搅拌一次，发酵24-48h；

步骤四：菌体富集：发酵结束后，用生理盐水对底物进行洗脱制成菌悬液，离心，弃上清，收集沉淀并用生理盐水使其重新悬浮，得到菌悬液；

步骤五：配置保护剂：取海藻糖、脱脂乳粉、麦芽糊精和玉米淀粉用蒸馏水溶解并混合均匀，灭菌；

步骤六：热胁迫处理：对步骤四制得的菌悬液进行热胁迫处理，待温度降至室温，加入保护剂，充分混匀；

步骤七：喷雾干燥带流化床干燥：将添加有保护剂的菌液加入喷雾流化干燥机中进行干燥，得到混菌制剂。

2.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤一中，所述灭菌为高压蒸汽灭菌，灭菌温度121℃，时间20min。

3.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤二中，所述发酵剂为植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌和丁酸梭菌，各菌种比例为2：3：1：1。

4.根据权利要求3所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：发酵剂中各菌种活菌数均为6×10⁷cfu/ml，接种温度为室温。

5.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤四中，所述离心的速度4000-8000r/min，时间10-20min。

6.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤五中，所述海藻糖、脱脂乳粉、麦芽糊精和玉米淀粉的质量比例为2：1：1：2。

7.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤五中，所述灭菌的温度为121℃，时间为20min。

8.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤六中，所述热胁迫的温度为45-60℃，时间为10-30min。

9.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤七中，控制保护剂的添加量为10wt.％～15wt.％。

10.根据权利要求1所述的一种饲料用益生菌的制备方法，其特征在于：步骤七中，喷雾干燥带流化床干燥：进风温度为250-300℃，流化气速1.5-2m/s、床层温度110-130℃、雾化压力0.2～0.5MPa、料液流速为0.5-1L/h。