[发明专利]一种洋橄榄叶素衍生物的制备方法

说明书

本发明提供了一种洋橄榄叶素衍生物及其制备方法和应用，属于抗菌剂技术领域。本发明提供的洋橄榄叶素衍生物具有式I所示的结构，式I中，R为甲基或乙基。本发明提供的洋橄榄叶素衍生物结构新颖，对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、人型葡萄球菌和粪肠球菌的抗菌性能优异。

技术领域

本发明涉及抗菌剂技术领域，具体涉及一种洋橄榄叶素衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

洋橄榄叶素(英文名称：Elaiophylin，Azalomycin B，Gopalamicin，或Salbomycin)是一类具有双重旋转对称的十六元环大环双内酯抗生素，具有抗菌、抗寄生虫、促进瘤胃动物增长等广泛的生物活性。

吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)是一类抗菌谱广、遗传性状稳定的放线菌，可产生尼日利亚菌素类、洋橄榄叶素类、格尔德霉素类、雷帕霉素类等多种类型代谢产物，具有抗菌、免疫抑制等多种生物活性。刘玉凤等(刘玉凤等.吸水链霉菌LP-93菌丝体中洋橄榄叶素衍生物的分离与结构鉴定.济宁医学院学报.2020,43(1):1-4)从吸水链霉菌LP-93菌丝体中分离出11,11′-O-二甲基-14′-去乙基-14′甲基-洋橄榄叶素，该洋橄榄叶素对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌、耐万古霉素粪肠球菌和抗结核杆菌具有较强的抑制活性。然而，目前对于吸水链霉菌中的其他洋橄榄叶素的研究还不够深入。

发明内容

鉴于此，本发明的目的在于提供一种洋橄榄叶素衍生物及其制备方法和应用，本发明提供的洋橄榄叶素衍生物结构新颖，对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、人型葡萄球菌和粪肠球菌的抗菌性能优异。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种洋橄榄叶素衍生物，具有式I所示的结构：

式I中，R为甲基或乙基。

本发明提供了上述技术方案所述洋橄榄叶素衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将吸水链霉菌LP-93进行种子培养，得到LP-93种子液；

(2)将所述LP-93种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养，调节得到的发酵液的pH值至3，离心分离，将所得沉淀物风干后粉碎，得到LP-93发酵干菌体粉；

(3)将所述LP-93发酵干菌体粉进行乙醇提取，将所得提取液浓缩，得到的浓缩物用甲醇溶解后过滤，将所得滤液浓缩，得到LP-93菌丝体提取物；

(4)将所述LP-93菌丝体提取物与乙酸乙酯混合，得到可溶部分F1；

(5)将所述可溶部分F1进行硅胶柱色谱分离，依次得到组分F1-1～F1-20；将其中的组分F1-15进行C₁₈HPLC分离，得到R为甲基的洋橄榄叶素衍生物；

或将其中的组分F1-18进行RP-HPLC分离，得到R为乙基的洋橄榄叶素衍生物；

所述硅胶柱色谱分离采用梯度洗脱方式，所述梯度洗脱为采用二氯甲烷和甲醇体积比为50:1、25:1、12.5:1、6.25:1和1:1的洗脱剂依次进行洗脱；

所述C₁₈HPLC分离采用的流动相为第一甲醇水溶液，所述第一甲醇水溶液中甲醇和水的体积比为92:8；

所述RP-HPLC分离采用的流动相为第二甲醇水溶液，所述第二甲醇水溶液中甲醇和水的体积比为91:9。

优选的，步骤(1)中，所述种子培养的温度为25～28℃，时间为48～72h。