[发明专利]一种血清中脂肪酸质的提取方法

权利要求书

1.一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：包含以下步骤：

步骤一：取血清样本，并对血清样本进行预处理；

步骤二：血清样本预处理完成后制得提取液，在提取液中加入酸催化剂，水浴加热；

步骤三：加热完成后，加入正己烷和生理盐水，涡旋振荡混匀后离心取上层清液，氮气吹干后，复溶；

步骤四：复溶后液体加入衍生化试剂，在密封反应系统中加热后，振荡摇匀，离心去上层清液收集；

步骤五：取离心后上清液置于C₁₈反相色谱柱中进行色谱分析。

2.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤一血清样本预处理方法具体为在血清样本中加入提取剂后在4℃下以3500r/min速度离心10-15min后取上层清液留样制得提取液。

3.根据权利要求2所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述提取剂为氯仿与甲醇以1∶3比例混合的混合溶液，且所述提取剂与血清样本的混合比为1-1.5∶1。

4.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤二中酸催化剂具体为硫酸-甲醇(H₂SO₄/MeOH)溶液，所述酸催化剂与提取液的混合比为1∶6-10。

5.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤二水浴加热温度为60-90℃，加热时间1-2h。

6.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤三加热完成后液体与正己烷和生理盐水的调配比为1∶1∶2，所述涡旋振荡时间为30-60s，并在4℃下以3000r/min离心10-15min。

7.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤三中氮气流速为2-4ml/min，吹干时间为3-5min，且吹干后复溶液为正己烷，所述复溶液与提取液剂量相同。

8.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤四中衍生化试剂具体为氨甲基吡啶衍生化试剂，所述衍生化试剂与复溶液的混合比为0.1-0.3∶1。

9.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤四中密封反应系统温度为80-90℃反应时间为10-15min，反应后振荡摇匀以5000-6000r/min速度离心5-10min后取上清液。

10.根据权利要求1所述的一种血清中脂肪酸质的提取方法，其特征在于：所述步骤五中检测流动相为甲醇/乙腈/水以60∶30∶10比例混合的混合液，柱温为20-25℃，流速在100-120ml/min之间。