[发明专利]一种血清中脂肪酸质的提取方法

说明书

本发明涉及脂肪酸检测技术领域，具体地说，涉及一种血清中脂肪酸质的提取方法主要包括包含以下步骤：取血清样本，并对血清样本进行预处理；血清样本预处理完成后制得提取液，在提取液中加入酸催化剂，水浴加热；加热完成后，加入正己烷和生理盐水，涡旋振荡混匀后离心取上层清液，氮气吹干后，复溶；复溶后液体加入衍生化试剂，在密封反应系统中加热后，振荡摇匀，离心去上层清液收集；取离心后上清液置于C18反相色谱柱中进行色谱分析。该发明有效的提高了现有技术在对脂肪酸提取检测的不足，将甲酯化和HPLC‑MS检测技术相结合，大大提高血液中游离脂肪酸的提取和检测精度，操作流程简单易操作，提高脂肪酸的检测提取效率。

技术领域

本发明涉及儿脂肪酸检测技术领域，具体地说，涉及一种血清中脂肪酸质的提取方法。

背景技术

脂肪酸是由碳、氢、氧三种元素组成的一类化合物，是中性脂肪、磷脂和糖脂的主要成分。

脂肪酸可分成两类：一类是分子内不带碳碳双键的饱和脂肪酸，如硬脂酸、软脂酸等；另一类是分子内带有一个或几个碳碳双键的不饱和脂肪酸，最常见的有油酸，油酸的碳链中只有一个碳碳双键，所以又叫单不饱和脂肪酸。一般脂肪酸化合物的碳链都较短，其长度一般在18-36个碳原子，最少的就是12个碳原子，如月桂酸。不管饱和的或不饱和的，生物体内脂肪酸的碳原子数大多是偶数，极少含有奇数碳原子，尤其是在高等动植物体内主要存在12碳以上的高级脂肪酸，一般在14-24个碳，以16和18碳脂肪酸最为常见。奇数碳原子脂肪酸仅在一些植物、反刍动物、海洋生物、石油酵母等体内部分存在。

含有多量饱和脂肪酸的甘油i酯在常温时往往是固体，例如牛油、羊油等，大多属动物脂肪。含有较多不饱和脂肪酸的甘油三酯在常温时往往是液体，例如玉米油、菜油等。植物和鱼类的油大多是不饱和脂肪酸的甘油酯。动物体内不能合成带有2-4个双键的不饱和脂肪酸，必须从食物中取得，因而这些脂肪酸就叫必需脂肪酸，也有人叫它维生素F。虽然已认为它们能降低血液中的胆固醇，但还没有证据能证明人会因为食物中缺乏这些脂肪酸而引起疾病。微生物中也含有不饱和脂肪酸，蓝细菌最独特之处是含有两个或多个双键组成的不饱和脂肪酸，而细菌通常只含有饱和脂肪酸和一个双键的不饱和脂肪酸。

游离脂肪酸又称非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acid NEFA)，血清中含量很少，如用小量血清标本测定必须采用灵敏的方法，并要避免脂肪水解产生的脂肪酸的干扰。NEFA是由油酸，软脂酸，亚油酸等组成，大部分游离脂肪酸与白蛋白结合，存在于血液中。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关，游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。

在人体血液中脂肪酸已经是反映机体状态的重要指标，现如今对血清中脂肪酸含量检测技术在实际使用中存在较大不足，由于检测过程中未对脂肪酸做甲酯化处理，使得最终脂肪酸检测结果精度较差，同时采用传统的气相色谱-质谱联用方法由于检测过程温度较高对于部分脂肪酸检测结果较差。

发明内容

本发明的目的在于提供一种血清中脂肪酸质的提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

一种血清中脂肪酸质的提取方法，包含以下步骤：

步骤一：取血清样本，并对血清样本进行预处理；

步骤二：血清样本预处理完成后制得提取液，在提取液中加入酸催化剂，水浴加热；

步骤三：加热完成后，加入正己烷和生理盐水，涡旋振荡混匀后离心取上层清液，氮气吹干后，复溶；

步骤四：复溶后液体加入衍生化试剂，在密封反应系统中加热后，振荡摇匀，离心去上层清液收集；

步骤五：取离心后上清液置于C18反相色谱柱中进行色谱分析。