[发明专利]一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法

权利要求书

1.一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法包括以下步骤：

步骤一，对玻碳电极进行处理，去除表面杂质，得到裸玻碳电极；

步骤二，以石墨粉为原料，通过Hummers氧化法进行氧化石墨烯的制备；

步骤三，使用制备的氧化石墨烯进行还原，制备石墨烯；

步骤四，将石墨烯分散在壳聚糖-醋酸溶液中，超声震荡，得到石墨烯-壳聚糖悬浊液；

步骤五，将裸玻碳电极置于石墨烯-壳聚糖悬浊液中，通过电聚合把酶负载在玻碳电极表面，得到石墨烯-壳聚糖修饰的玻碳电极；

步骤六，进行Ag/AgCl电极的制备，以及进行铂电极的制备；

步骤七，使用石墨烯-壳聚糖修饰的玻碳电极作为工作电极，使用Ag/AgCl电极、铂电极作为辅助电极，得到实现过氧化氢检测的酶传感器。

2.如权利要求1所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤一中，所述对玻碳电极进行处理，包括：

(1)将玻碳电极依次用0.3μm、0.05μm的三氧化二铝悬浊液抛光成镜面；

(2)将抛光后的玻碳电极使用体积分数为95％的乙醇进行超声清洗；

(3)使用去离子水对清洗后的玻碳电极进行再次超声清洗，得到裸玻碳电极。

3.如权利要求1所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤二中，所述以石墨粉为原料，通过Hummers氧化法进行氧化石墨烯的制备，包括：

1)在反应桶内加入石墨粉、浓硫酸、硝酸钠，6℃以下低温搅拌；

2)加入高锰酸钾，置于5-10℃环境下进行反应，得到混合液A；

3)加入去离子水并浆混合液升温至80-90℃，继续搅拌反应，得到混合液B；

4)向混合液B中依次加入双氧水、盐酸溶液，搅拌至出现沉淀，得到混合液C；

5)对混合液C进行低速离心，洗涤，然后调节pH值为7，得到氧化石墨溶液；

6)在氧化石墨溶液中加入去离子水，超声震荡，取上层悬浊液进行烘干，得到氧化石墨烯。

4.如权利要求3所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤5)中，所述调节pH值，包括：使用氢氧化钠溶液进行pH值调节。

5.如权利要求1所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤三中，所述使用制备的氧化石墨烯进行还原，制备石墨烯，包括以下步骤：

步骤A，对制备的氧化石墨烯进行研磨，得到氧化石墨烯粉末；

步骤B，将氧化石墨烯粉末与去离子水混合，超声震荡，得到氧化石墨烯水分散液；

步骤C，将还原剂分散于氧化石墨烯水分散液中，调节pH值，得到混合分散液；

步骤D，将混合分散液加热至60-90℃进行1-2h反应，得到石墨烯。

6.如权利要求5所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤C中，所述还原剂为：维生素C。

7.如权利要求1所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤四中，所述壳聚糖-醋酸溶液的浓度为0.5％(w/w)。

8.如权利要求1所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤五中，所述通过电聚合把酶负载在玻碳电极表面，包括：

将裸玻碳电极置于石墨烯-壳聚糖悬浊液中，进行循环伏安法扫描得到石墨烯-壳聚糖修饰的玻碳电极。

9.如权利要求1所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤六中，所述进行Ag/AgCl电极的制备，包括：

步骤Ⅰ，以柔性PDMS作为电极基底材料，将电极基底材料浸泡于5wt％Gly和2wt％PVA组成的修饰液中进行表面亲水修饰；

步骤Ⅱ，在柔性PDMS电极基底表面进行银纳米线的涂布，并进行烘干；

步骤Ⅲ，将烘干后的电极置于NaClO溶液中进行浸泡，得到Ag/AgCl电极。

10.如权利要求9所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，其特征在于，步骤Ⅲ中，所述NaClO溶液的浓度为20mg/mL。