[发明专利]一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法

说明书

本发明属于化合物检测技术领域，公开了一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法包括：将裸玻碳电极置于石墨烯‑壳聚糖悬浊液中，通过电聚合把酶负载在玻碳电极表面，得到石墨烯‑壳聚糖修饰的玻碳电极；使用石墨烯‑壳聚糖修饰的玻碳电极作为工作电极，使用Ag/AgCl电极、铂电极作为辅助电极，得到实现过氧化氢检测的酶传感器。本发明在玻碳电极上电聚合石墨烯‑壳聚糖，增加了活性基团，能够促进电子转移。本发明制备的实现过氧化氢检测的酶传感器通过电聚合把酶负载在石墨烯表面制备酶传感器，由于功能化的石墨烯有良好的电化学性能，将其引入酶传感器中能显著提高酶传感器的性能。

技术领域

本发明属于化合物检测技术领域，尤其涉及一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法。

背景技术

目前：过氧化氢俗称双氧水，其化学式为H₂O₂，因其极强的氧化性、漂白性和杀菌性能，被广泛应用于工业生产、医学和美容等行业。在美容行业，过氧化氢因其能去除污渍则经常被添加在化妆品当中，达到美白肌肤、清理代谢物的效果。但过氧化氢的滥用会引起人体基因突变，动物癌症，加速人体细胞老化，引发多种皮肤疾病，严重的甚至还会出现呼吸困难、视力障碍等。因此，发展快速、高灵敏度的过氧化氢检测方法对环境保护和人类健康有着重要作用。

石墨烯是由碳原子按六边形晶格整齐排布而成的二维碳质新材料，具有大的比表面积、高的导电性、较好的机械稳定性和良好的生物相容性等特性，使其在电化学生物传感领域具有很好的应用。但是由于石墨烯的片层之间的强烈的π-π作用使其在溶液中的分散性受到严重影响，很容易发生聚集沉淀，限制了其在电化学生物传感器中的应用，因此有必要对石墨烯进行共价功能化或非共价功能化对其改性以实现石墨烯在溶液中的分散。共价功能化会破坏石墨烯原有的结构特征，使其本征性能受到不同程度的影响。而非共价功能化能较好的保持石墨烯的固有性能，因此近年来受到了广泛关注。但是目前暂无使用石墨烯构建过氧化氢生物传感器的方案，现有的酶传感器进行过氧化氢检测的方法对过氧化氢的检测成本高、操作复杂、检测时间长。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前暂无使用石墨烯构建过氧化氢生物传感器的方案，现有的酶传感器进行过氧化氢检测的方法对过氧化氢的检测成本高、操作复杂、检测时间长。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法。

本发明是这样实现的，一种实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法，所述实现过氧化氢检测的酶传感器的制备方法包括以下步骤：

步骤一，对玻碳电极进行处理，去除表面杂质，得到裸玻碳电极；

步骤二，以石墨粉为原料，通过Hummers氧化法进行氧化石墨烯的制备；

步骤三，使用制备的氧化石墨烯进行还原，制备石墨烯；

步骤四，将石墨烯分散在壳聚糖-醋酸溶液中，超声震荡，得到石墨烯-壳聚糖悬浊液；

步骤五，将裸玻碳电极置于石墨烯-壳聚糖悬浊液中，通过电聚合把酶负载在玻碳电极表面，得到石墨烯-壳聚糖修饰的玻碳电极；

步骤六，进行Ag/AgCl电极的制备，以及进行铂电极的制备；

步骤七，使用石墨烯-壳聚糖修饰的玻碳电极作为工作电极，使用Ag/AgCl电极、铂电极作为辅助电极，得到实现过氧化氢检测的酶传感器。

进一步，步骤一中，所述对玻碳电极进行处理，包括：

(1)将玻碳电极依次用0.3μm、0.05μm的三氧化二铝悬浊液抛光成镜面；

(2)将抛光后的玻碳电极使用体积分数为95％的乙醇进行超声清洗；