[发明专利]一种室温稳定的单组分TMB显色液及其制备方法

权利要求书

1.一种室温稳定的单组分TMB显色液，其特征在于，包括以下组分：聚乙烯醇0.001g/L-20g/L，阿拉伯糖0.16g/L-30g/L，柠檬酸1mM-100mM，乙二胺四乙酸二钠1mM-20mM，30％过氧化氢水溶液1mM-10mM，TMB 1mM-3mM，DMSO20ml/L-30ml/L，Proclin3000.04％，磷酸氢二钠1mM-25mM，超纯水定容至1L。

2.根据权利要求1所述一种室温稳定的单组分TMB显色液，其特征在于，所述单组分TMB显色液采用柠檬酸和磷酸氢二钠缓冲液，且缓冲液的pH值为3.1-3.6。

3.根据权利要求1所述一种室温稳定的单组分TMB显色液，其特征在于，所述聚乙烯醇为1788低粘度型聚乙烯醇，且聚乙烯醇的聚合度为1700，醇解度为88％。

4.根据权利要求1-3任一项所述的一种室温稳定的单组分TMB显色液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：试剂母液配制：

1.1：50g/L聚乙烯醇配制：准确称取5g 1788低粘度型聚乙烯醇于烧杯中，加入适量超纯水，置于65℃恒温水浴锅中，通过玻璃棒持续搅拌使颗粒分散均匀，溶解后继续保温2小时，超纯水定容至100ml，使用0.45μm滤膜过滤，以除去可能存在的极微小未溶解颗粒；

1.2：TMB母液配制：准确称取TMB粉末于离心管中，加入适量的DMSO，涡旋振荡使其充分溶解，并在避光条件下待用；

1.3：其他试剂分别按照配方所用浓度要求配制；

步骤二：TMB体系配制：

2.1：首先在烧杯中加入适量超纯水，加入1788低粘度型聚乙烯醇母液，接着在磁力搅拌器上搅拌均匀，再依次加入阿拉伯糖、柠檬酸以及乙二胺四乙酸二钠，搅拌混匀；

2.2：然后，加入30％过氧化氢水溶液并搅拌均匀；

2.3：随后，将烧杯用锡箔纸包裹住，加入TMB母液并搅拌均匀；

2.4：接着，加入Proclin300并搅拌混匀，用磷酸二氢钠溶液调整体系pH值为3.1-3.6，超纯水定容至1L；

2.5：最后，使用0.22μm尼龙滤膜过滤，获得均一溶液，保存在棕色塑料瓶中，密封避光2-8℃存储。

5.根据权利要求4所述一种室温稳定的单组分TMB显色液及其配制方法，其特征在于，所述TMB显色液配制过程采用配制母液的方式配制各个组分，且阿拉伯糖除外，再按次序混合。

6.根据权利要求1所述一种室温稳定的单组分TMB显色液及其配制方法，其特征在于，所述TMB显色液配制过程所使用的烧杯、玻璃棒以及超纯水均经过高温高压灭菌处理。

7.根据权利要求1所述一种室温稳定的单组分TMB显色液及其配制方法，其特征在于，所述TMB体系配制的前一个组分混匀后再添加后一个。

8.根据权利要求1所述一种室温稳定的单组分TMB显色液及其配制方法，其特征在于，所述尼龙滤膜为有机溶剂耐受型。