[发明专利]一种基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法

权利要求书

1.一种基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)油茶籽油纯油样品收集：收集不同产地、不同品种的油茶籽油纯油样品和其他品种植物油；

(2)甲酯化处理与气相色谱分析：将上述油茶籽油纯油样品、其他品种植物油和掺假油茶籽油样品皂化后进行甲酯化处理，通过气相色谱技术采集油茶籽油纯油样品和掺假油茶籽油样品的原始脂肪酸指纹图谱；

(3)三萜化合物甲酯化处理与气质联用分析：将上述油茶籽油纯油样品、其他品种植物油和掺假油茶籽油样品皂化后保留的非皂化物进行甲酯化处理，通过气相色谱质谱联用技术采集油茶籽油纯油样品、其他品种植物油和掺假茶籽油样品的三萜化合物指纹图谱；

(4)油酸/山嵛酸比值计算：将采集的原始脂肪酸指纹图谱采用归一化面积法定量主要脂肪酸，计算顺式油酸甲酯/山嵛酸甲酯的比值；

(5)β香树脂醇/菜油甾醇比值计算：将采集的三萜化合物指纹图谱采用结合内标物的已知含量计算相对响应因子，结合标准曲线定量β香树脂醇和菜油甾醇，计算β香树脂醇/菜油甾醇的比值；

(6)掺假判别：顺式油酸甲酯/山嵛酸甲酯低于1200或β香树脂醇/菜油甾醇比值小于40时，则可以定性判别出油茶籽油中有其他品种植物油掺假。

2.根据权利要求1所述的基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述其他品种植物油为花生油、大豆油、菜籽油、葵花籽油、稻米油、玉米油、高油酸菜籽油、高油酸花生油、高油酸葵花籽油中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中采集油茶籽油纯油样品的数量为10-15个，油茶籽油纯油样品的制备采用浸出法或压榨法。

4.根据权利要求1所述的基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中油酸/山嵛酸的脂肪酸甲酯化处理采用酸碱结合法。

5.根据权利要求4所述的基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述酸碱结合法的工艺过程为：取1g纯茶油样品置于250mL的烧瓶中，加入100μL浓度1mg/mL的胆甾烷醇和质量浓度2％的氢氧化钾-乙醇溶液10mL，混匀，75℃下水浴回流30min，从中取出取5mL皂化液以备步骤(3)中三萜化合物甲酯化处理；从回流冷凝器上端加入5mL 15％三氟化硼甲醇溶液，水浴回流2min，用少量水冲洗回流冷凝器，停止加热，从水浴上取下烧瓶，迅速冷却至室温，准确加入10mL～30mL正庚烷，振摇2min，再加入饱和氯化钠水溶液，静置分层，吸取上层正庚烷提取溶液5mL至25mL试管中，加入3g～5g无水硫酸钠，振摇1min，静置5min，吸取上层溶液到进样瓶中待测定。

6.根据权利要求1所述的基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中的气相色谱技术分析条件为：岛津GCMS-2010plus、SP-2560毛细管柱100m*0.25mm*0.2μm；载气氮气；进样口温度：270℃；柱温：初始温度100℃，保持1min；10℃/min升温至180℃，保持6min；1℃/min升温至200℃，保持20min；4℃/min升温至230℃，保持10.5min；柱流速：1.04mL/min；分流比：100：1；进样量：1μL。

7.根据权利要求1所述的基于油酸/山嵛酸以及β-香树脂醇/菜油甾醇比值的油茶籽油掺假检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中三萜化合物甲酯化处理的工艺过程为：取步骤(2)中5mL皂化液过中性氧化铝柱，先用5mL乙醇活化后再用30mL正己烷洗脱非皂化物，收集洗脱液，洗脱液在65℃旋转蒸发器蒸干后复溶于5mL正己烷，转移到15mL玻璃离心小管中，氮吹干后加入100μL硅烷化衍生试剂，室温放置15分钟，加入1500μL正己烷稀释后过0.22μm有机滤膜。