[发明专利]一种定量分析烟用香精和料液中非挥发性有机酸的方法

权利要求书

1.一种定量分析烟用香精和料液中非挥发性有机酸的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a、内标溶液的配制：配制己二酸浓度为10mg/mL的甲醇溶液；

b、称取样品：称取1.0g香精或料液于50mL离心管中；

c、样品衍生化和萃取：准确加入50μL己二酸内标溶液和5mL10％硫酸甲醇溶液于离心管中，涡旋振荡后，静置24h；然后加入10mL水和5mL二氯甲烷，旋紧旋盖，以涡旋振荡后，离心；

d、过膜：取下层有机相过滤后进行GC/MS分析；

e、准备标准工作溶液：称取一定质量的不同有机酸标准品，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解配制标准储备液，然后继续用甲醇稀释，最终配制具有不同浓度梯度的有机酸标准工作溶液；

f、标准工作溶液衍生化和萃取：准确移取一定体积的具有不同浓度梯度的有机酸标准工作溶液，氮气吹干后，加入5mL10％硫酸甲醇溶液和50μL己二酸内标溶液，涡旋振荡后，静置24h；反应后加入10mL水和5mL二氯甲烷，旋紧旋盖，以涡旋振荡后，离心，取下层有机相过滤后进行GC/MS分析；

g、有机酸测定结果的计算：以内标法进行各有机酸目标物的定量分析，即以各目标物定量离子峰面积与内标峰定量离子峰面积之比为纵坐标，各目标物浓度与内标浓度之比为横坐标，得到线性回归方程；对提取后的样品进行测定，测得检出目标物定量离子峰面积和内标的定量离子峰面积比，代入线性回归方程，求得样品中各有机酸的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤e和f具体包括如下步骤：

步骤1)分别准确移取100mg草酸、50mg丙二酸、50mg琥珀酸、400mg苹果酸、50mg棕榈酸、100mg柠檬酸、50mg硬脂酸、300mg油酸、300mg亚油酸和100mg亚麻酸于10mL容量瓶中，精确至0.1mg，用甲醇定容，配制成10种有机酸的单一标准品储备液；在0℃～4℃条件下密封避光贮存；

步骤2)分别准确移取100μL上述单一标准储备液到10mL容量瓶中，用甲醇稀释定容，配制成混合标准溶液1；分别准确移取2000μL上述单一标准储备液到10mL容量瓶中，用甲醇稀释定容，配制成混合标准溶液2；

步骤3)标准工作曲线1：分别准确移取10μL、25μL、50μL、100μL、250μL、500μL混合标准溶液1于50mL离心试管中，氮气吹干后，加入5mL10％硫酸甲醇溶液和50μL己二酸内标溶液(10mg/mL)，振荡摇匀后，静置24h。反应后加入10mL水和5mL二氯甲烷，旋紧旋盖，以涡旋振荡后，离心n，取下层有机相过滤后进行GC/MS分析；

标准工作曲线2：分别准确移取500μL混合标准溶液1、100μL、250μL、500μL和1000μL混合标准溶液2于50mL离心试管中，其余处理过程同标准工作曲线1。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在GC/MS测定时，采用的色谱条件：HP-INNOWAX色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm)(美国安捷伦公司)；进样口温度：240℃；分流比：10∶1；载气：He；流量：1.0mL/min；升温程序：起始温度50℃，保持2min，以4℃/min升温至240℃，保持15min。