[发明专利]一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法有效

专利信息
申请号: 202011150599.9 申请日: 2020-10-24
公开(公告)号: CN112195215B 公开(公告)日: 2022-04-08
发明(设计)人: 吴倩;刘新琦;蔡建平 申请(专利权)人: 上海加新生物科技有限公司
主分类号: C12P39/00 分类号: C12P39/00;C12P13/04;C12N1/14;C12N1/06;C12R1/645
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 201100 上海市闵行*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 榆黄菇 松蕈 菌丝体 联合 发酵 生产 麦角 方法
【权利要求书】:

1.一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:包括以下步骤:

a.将榆黄菇和松蕈的组织块分别接种于固体培养基上,23-27℃条件下培养3-6天;

b.取榆黄菇菌丝体接种于种子培养基中培养2-3天;

c.取松蕈菌丝体接种到步骤b培养获得的榆黄菇种子液中并补加一定量的新鲜种子培养基,继续培养2-3天;

d.将步骤c培养获得的含有榆黄菇和松蕈的种子液以5-20 %发酵培养基体积的接种量接种到发酵培养基中并添加前体物质,发酵2-4天后再补加少量前体物质,继续发酵3-4天;

e.对发酵后的发酵液进行处理,得到含有麦角硫因的发酵液;

所述榆黄菇为Pleurotus citrinopileatus,所述松蕈为Tricholoma matsutake

所述前体物质选用组氨酸、组氨酸三甲基内盐、巯基组氨酸三甲基内盐、甜菜碱、半胱氨酸、γ-谷氨酸-半胱氨酸中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤b、c中,种子培养基包括以下组分和含量:15-25g/L马铃薯、5-10g/L玉米粉、6-12g/L豆饼粉、0.5-0.8g/L MgSO4·7H2O、1-2g/L KH2PO4和0.001-0.003g/L维生素B1,调剂pH至5-6.5。

3.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤b、c中,种子培养的培养条件为:23-27℃条件下,160-180r/min恒温震荡;步骤b中种子培养基的装液量为摇瓶容积的20%-25%。

4.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤b中,将1-4cm2的榆黄菇菌丝体接种于种子培养基;步骤c中,将9-16cm2的松蕈菌丝体接种到榆黄菇种子液中。

5.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤c中,新鲜种子培养基的补加量为原种子培养基体积的1/4-1/3。

6.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤d中,发酵培养基包括以下组分和含量:10-15g/L葡萄糖、12-18g/L胰蛋白胨、3-7g/L尿素、0.2-0.3g/L MgSO4·7H2O、0.8-1.2g/L KH2PO4和0.001-0.003g/L维生素B1,调节pH至5-6.5。

7.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤d中,发酵培养基中前体物质的加入量为10-25mM,补加前体物质的量为4-9mM。

8.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤d中,发酵培养的培养条件为:25-28℃条件下,180-220r/min恒温震荡;发酵培养基的装液量为摇瓶容积的15%-20%。

9.根据权利要求1所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤e中,发酵液的处理方法包括以下步骤:

Ⅰ.将发酵后的发酵液在功率为300-500W、温度为50-70℃的条件下进行微波处理3-5min;

Ⅱ.将微波处理后的发酵液再在400-500W的条件下进行超声处理3-5min;

Ⅲ.将超声处理后的发酵液进行固液分离,得到含有麦角硫因的溶液。

10.根据权利要求9所述的一种榆黄菇松蕈菌丝体联合发酵生产麦角硫因的方法,其特征在于:步骤Ⅲ中,采用离心的方式将处理后的发酵液进行固液分离,离心条件为12000-13000rpm/min,离心5-8min。

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