[发明专利]一种透明质酸的生产方法有效
| 申请号： | 202011150607.X | 申请日： | 2020-10-24 |
| 公开（公告）号： | CN112195210B | 公开（公告）日： | 2022-01-04 |
| 发明（设计）人： | 刘英;王华倩;王红娟;蔡建平 | 申请（专利权）人： | 上海加新生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/26 | 分类号： | C12P19/26;C12R1/225;C12R1/46 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201100 上海市闵行*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 透明 生产 方法 | ||
1.一种透明质酸的生产方法，其特征在于：包括以下步骤：
a.将马疫链球菌CNCMⅠ-4645接种在平板培养基上，在35-40℃条件下活化培养12-24h；
b.将活化后的马疫链球菌CNCMⅠ-4645接种到种子培养基中，在35-40℃、200-300r/min的条件下培养8-14h，得到马疫链球菌CNCMⅠ-4645种子液；
c.将副干酪乳杆菌IJH-SONE68接种到种子培养基中，在36-38℃的条件下培养12-24h，得到副干酪乳杆菌IJH-SONE68种子液；
d.将马疫链球菌CNCMⅠ-4645种子液和副干酪乳杆菌IJH-SONE68种子液接种到发酵培养基上，在30-33℃、150-250r/min、发酵液pH控制在7.8-8.1的条件下发酵培养8-10h，再在35-38℃、300-500r/min、发酵液pH控制在6.8-7.2的条件下继续发酵9-12h，得到含有透明质酸的发酵液。
2.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤b、c中，种子培养基包括以下组分和含量：15-25g/L葡萄糖、12-18g/L酵母膏、0.5-0.8g/L MgSO4·7H2O 、1-2g/L KH2PO4，调节pH至7.5。
3.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤b中，种子培养基的装液量为摇瓶容积的10%-15%；步骤c中，种子培养基的装液量为摇瓶容积的40%-50%。
4.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤d中，发酵培养基包括以下组分和含量：50-60g/L葡萄糖、12-18g/L酵母膏、1.5-2g/L MgSO4·7H2O、1-2g/LKH2PO4，调节pH至7.5。
5.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤d中，发酵培养基的装液量为摇瓶容积的8%-12%。
6.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤d中，马疫链球菌CNCMⅠ-4645种子液的接种量为发酵培养基体积的5-20 %。
7.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤d中，副干酪乳杆菌IJH-SONE68种子液的接种量为发酵培养基体积的3-8 %。
8.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤d中，将两种菌的种子液接种到发酵培养基后，并向发酵培养基中加入丙酮，丙酮的加入量为发酵培养基体积的0.8-1.2%。
9.根据权利要求1所述的一种透明质酸的生产方法，其特征在于：步骤d中，发酵8-10h后，向发酵液中加入2-5%发酵培养基体积的前体物质，所述前体物质选用UDP-葡糖醛酸或UDP-N-乙酰氨基葡萄糖。
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