[发明专利]一种透明质酸的生产方法

说明书

本申请公开了一种透明质酸的生产方法，步骤如下：将马疫链球菌进行活化培养；将活化后的马疫链球菌接种到种子培养基中，在35‑40℃、200‑300r/min的条件下培养8‑14h；将副干酪乳杆菌接种到种子培养基中，在36‑38℃的条件下培养12‑24h；将马疫链球菌种子液和副干酪乳杆菌种子液接种到发酵培养基，在30‑33℃、150‑250r/min的条件下发酵培养8‑10h，再在35‑38℃、300‑500r/min的条件下继续发酵9‑12h，得到含有透明质酸的发酵液。本申请将马疫链球菌和副干酪乳杆菌进行共同发酵，副干酪乳杆菌可以抑制发酵体系中透明质酸酶的活性，保证了发酵液中透明质酸的活性和产量。

技术领域

本申请涉及透明质酸的制备技术领域，特别涉及一种透明质酸的生产方法。

背景技术

透明质酸(Hyaluronic acid，简称 HA)又名玻璃酸，是一种由葡萄糖醛酸和 N-乙酰氨基葡萄糖胺通过β-1,3 和β-1,4 糖苷键反复交替连接而成的一种链状高分子聚合物，广泛存在于皮肤、眼玻璃体、脐带、软骨、关节滑液等生物体各种组织中，并在其中起到保湿、营养、修复和预防损伤等生理作用。透明质酸具有极好的保水性和协助渗透的特性，在医药、化妆品、食品保健等领域得到广泛研究与应用。

由于透明质酸的分子量能够显著影响其理化特性与应用效果，所以根据分子量的不同将透明质酸分为高分子量透明质酸(HMHA，Mr2×10⁶Da)和低分子量透明质酸(LMHA，Mr1×10⁶Da)。高分子量HA具有良好的黏弹性和保湿、润滑功能，一般应用于医药领域；低分子量HA外用时能被皮肤吸收，能有效增加皮肤弹性，一般应用于化妆品和食品领域。

透明质酸传统的制备方法是采用动物组织为原料，从人脐带、鸡冠、猪牛羊眼的玻璃体中提取透明质酸，但动物组织价格昂贵，且产品的产率低，所以微生物发酵生产透明质酸的技术应运而生。微生物发酵法就是利用兽疫链球菌、马疫链球菌等链球菌属菌种通过其自身的生理代谢而产生透明质酸的过程。但是，目前微生物发酵生产透明质酸的产量普遍不高，不能进行规模化生产，不能满足日益增长的市场需求。

发明内容

针对现有技术存在的透明质酸产量低的问题，本申请的目的是提供一种透明质酸的生产方法，以达到提高透明质酸产量的技术效果。

本申请的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种透明质酸的生产方法，包括以下步骤：

a.将马疫链球菌CNCMⅠ-4645接种在平板培养基上，在35-40℃条件下活化培养12-24h；

b.将活化后的马疫链球菌CNCMⅠ-4645接种到种子培养基中，在35-40℃、200-300r/min的条件下培养8-14h，得到马疫链球菌CNCMⅠ-4645种子液；

c.将副干酪乳杆菌IJH-SONE68接种到种子培养基中，在36-38℃的条件下培养12-24h，得到副干酪乳杆菌IJH-SONE68种子液；

d.将马疫链球菌CNCMⅠ-4645种子液和副干酪乳杆菌IJH-SONE68种子液接种到发酵培养基上，在30-33℃、150-250r/min的条件下发酵培养8-10h，再在35-38℃、300-500r/min的条件下继续发酵9-12h，得到含有透明质酸的发酵液。