[发明专利]一种用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸及制备方法在审
申请号: | 202011151402.3 | 申请日: | 2020-10-25 |
公开(公告)号: | CN112611863A | 公开(公告)日: | 2021-04-06 |
发明(设计)人: | 熊攀;李强 | 申请(专利权)人: | 武汉金鉴生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/532 |
代理公司: | 武汉领君知识产权代理事务所(普通合伙) 42248 | 代理人: | 汪俊锋 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 2019 新型 冠状病毒 胶体 试纸 制备 方法 | ||
1.一种用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸,其特征在于:包括PVC胶板以及依次搭接在所述PVC胶板上的吸样垫、胶体碲结合垫、层析膜、吸水材料;
所述吸样垫为含非离子型表面活性剂的玻璃纤维膜;
所述胶体碲结合垫为含胶体碲标记的鸡IgY复合物和胶体碲标记的新型冠状病毒S1抗体1复合物的玻璃纤维膜或聚脂膜;其中,新型冠状病毒S1抗体1为北京义翘神州科技股份有限公司的货号为40592-R001的兔单克隆抗体;
所述层析膜为硝酸纤维素膜,其上间隔设有检测线、质控线,所述检测线上喷涂有新型冠状病毒S1抗体2,所述质控线上喷涂有羊抗鸡IgY多克隆抗体,其中,新型冠状病毒S1抗体2为北京义翘神州科技股份有限公司的货号为40591-T62的兔多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸,其特征在于:所述非离子型表面活性剂是曲拉通-100。
3.根据权利要求1所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸,其特征在于:所述胶体碲结合垫中鸡IgY与新型冠状病毒S1抗体1的质量比为3:1。
4.根据权利要求1所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸,其特征在于:所述胶体碲以羟丙基甲基纤维素为模板,亚碲酸、维生素C为反应原料制成。
5.根据权利要求4所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸,其特征在于:羟丙基甲基纤维素、亚碲酸、维生素C的质量比为1-5:2:10-30。
6.权利要求1-5任一项所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1、吸样垫的制备:将第一膜材料用第一处理液浸渍处理,烘干得到样品垫;所述第一膜材料为玻璃纤维膜;所述第一次处理液包含如下按质量百分比计的组分:硼酸0.02-0.1%,硼砂0.05-0.25%,曲拉通-100 0.5-1.5%,酪蛋白0.1-1%,余量为水;
S2、胶体碲结合垫的制备:将胶体碲标记的鸡IgY和胶体碲标记的新型冠状病毒S1抗体1混合制备的第二处理液浸渍在第二膜材料上,干燥后得到胶体碲结合垫;所述第二膜材料可以是玻璃纤维膜或聚脂膜;
S3、层析膜的制备:将浓度新型冠状病毒S1单克隆抗体2、羊抗鸡IgY间隔的喷涂在第三膜材料上形成检测线、质控线;所述第三膜材料为硝酸纤维素膜;
S4、组装:将吸水材料以及制得的吸样垫、胶体碲结合垫、层析膜按序粘贴在上的固定位置,分切得到用于唾液检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸。
7.根据权利要求6所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸的制备方法,其特征在于:步骤S2中,所述第二处理液的制备方法包括:
S21、胶体碲制备:取1g羟丙基甲基纤维素加入到100mL纯化水中搅拌均匀得到模板;分别加入10g维生素C和2g亚碲酸,搅拌均匀;继续反应30分钟,得到胶体碲;
S22、鸡IgY-胶体碲复合物的制备:取1mL步骤S21制备的胶体碲,加入5-50μL 0.1M碳酸钾后混匀,调pH至8.0-10.0;再依次加入5-30μg的鸡IgY、50-100μL 10%牛血清白蛋白,混匀;
S23、新型冠状病毒S1抗体1-胶体碲复合物的制备:取1mL步骤S21制备的胶体碲加入10-50μL 0.1M碳酸钾混匀,调整pH至8.0-10.0,再依次加入5-20μg的新型冠状病毒S1抗体1、50-100μL 10%牛血清白蛋白,混匀;
S24、胶体碲复合物的纯化:分别将步骤S22制备的鸡IgY-胶体碲复合物和步骤S23制备的新型冠状病毒S1抗体1-胶体碲复合物离心,弃除上清,再加入等体积的复溶液复溶;所述复溶液包含如下按质量百分比计的组分:0.06%硼酸、0.15%硼砂、0.5%酪蛋白、0.5% S-9、0.1%牛血清白蛋白、0.5%聚乙烯吡咯烷酮、20%蔗糖和5%海藻糖,余量为纯化水;
S25、将复溶后的鸡IgY-胶体碲复合物和新型冠状病毒S1单克隆抗体1-胶体碲复合物按2:1体积比混合,得到第二处理液。
8.根据权利要求6所述的用于检测2019新型冠状病毒的胶体碲试纸的制备方法,其特征在于:步骤S1的烘干条件为:30~60℃下烘干10~24h;步骤S2的烘干条件为:30~55℃下烘干10~24h;步骤S3的烘干条件为:30~50℃下烘干4~12h。
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