[发明专利]一种提高艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白稳定性的冻干粉

说明书

本发明一种提高艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白稳定性的冻干粉、制备方法及应用，冻干粉由重组艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白和辅料制成，重组艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白和辅料结合后结构稳定，辅料包括赋形剂、稳定剂、促溶剂和渗透压缓冲维持剂，还可添加其他有助于重组艾塞那肽人血清白蛋白融合结构稳定的增溶剂、赋形剂、稳定剂、渗透压维持剂、抑菌剂和缓冲体系等。本发明提供的提高艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白稳定性的冻干粉、制备方法及应用，可使活性成分重组艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白长期保持稳定，产品2～8℃保存有效期达36个月，含量及生物活性维持在规定范围内，符合产品质量标准要求，提高药物的临床治疗价值和适用性。

技术领域

本发明属于药剂学技术领域，具体涉及一种提高艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白稳定性的冻干粉、制备方法及应用。

背景技术

II型糖尿病是危害我国乃至全世界人民身体健康最重要的慢性病之一，2013年我国糖尿病患者人数已经达到1.32亿，预计发病人数将进一步增加，是一个重大的民生问题。糖尿病产生的原因主要有胰岛素分泌不足或胰岛素的利用障碍，除早期可以通过控制饮食、加强煅炼来进行治疗外，其治疗方法主要是增加患者体内的胰岛素水平、增加患者对胰岛素的敏感性，除了化学治疗药物，主要是使用胰岛素进行治疗。但胰岛素治疗的主要缺点是会引起低血糖反应、抑制患者自身的胰岛素分泌，甚至会产生对胰岛素药物的依赖性及胰岛素抗性。

促胰岛素分泌肽类药物，包括GLP-1、艾塞那肽（Exendin-4）及其类似物，能通过cAMP和/或其它细胞内信号通路来增强葡萄糖依赖性的胰岛合成和体内胰腺β细胞的胰岛素分泌，抑制胰高血糖素过量分泌，同时还可以通过降低II型糖尿病患者空腹和餐后血糖浓度来改善血糖控制，具有保护患者胰岛功能、增加自身胰岛素分泌量、提高患者对胰岛素的敏感性等优点。促胰岛素分泌肽类药物促胰岛素分泌功能受到血糖水平的反馈调节，不会引起低血糖，可以克服胰岛素治疗的缺点，被称为“智慧型”药物。

艾塞那肽是促胰岛素分泌肽类药物中的一种，是第一个被制成治疗II型糖尿病的药物。由于天然的艾塞那肽是一种多肽分子（分子量为4186 Da），体内清除速率快，半衰期短，患者需要每天注射2次才能达到满意的治疗效果，给患者带来不便和痛苦。

本申请专利的申请人于2008年申请了中国发明专利ZL 200810018639.7，采用基因工程技术将编码艾塞那肽的基因序列与编码人血清白蛋白（Human Serum Albumin）分子基因序列融合在一起，构建表达艾塞那肽人血清白蛋白融合蛋白（Exendin-4-HSA）的酵母表达系统，成功地制备了分子量为70.6kDa的Exendin-4-HSA融合蛋白，该融合蛋白分子保持了Exendin-4的降血糖生物活性，同时其在体内的半衰期明显延长，患者每周只需要注射一次即达到满意的降血糖效果，从而增加了药品临床应用价值与医从性，有效地解决了短肽艾塞那肽用于临床治疗的缺点，是一个应用前景非常广泛的II型糖尿病长效治疗新药。

Exendin-4-HSA是一个大分子融合蛋白，由艾塞那肽与人血清白蛋白组成。人血清白蛋白虽然是一个结构非常稳定的天然分子，但是与外源性分子艾塞那肽融合形成一个新的融合蛋白分子后，其结构及理化特性便发生了改变，其稳定性亦随之发生改变，在水溶液中长期保存易发生降解、聚合等现象，从而导致艾塞那肽生物活性丧失，影响了药物的治疗效果及其长效性，不利于药物的长期保存与应用。为了解决这一问题，需要开发能够长期保持Exendin-4-HSA融合蛋白稳定性的制剂配方与剂型。