[发明专利]一种饲料中喹诺酮类药物的检测方法

说明书

本发明公开了一种饲料中喹诺酮类药物的检测方法，步骤为：（1）采用超高压液相色谱‑四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪测定待测喹诺酮类药物的精确质量数据库和质谱谱库；（2）将饲料用甲酸乙腈溶液提取，提取液经分子印迹整体柱固相萃取并洗脱后得到前处理后的样品；（3）样品检测；（4）将样品检测结果与建立的精确质量数据库和质谱谱库进行对比分析，当检测结果与精确质量数据库和质谱谱库信息完全匹配时，则确定样品中检测出待测喹诺酮类药物。本发明采用超高压液相色谱‑四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用法对饲料中的喹诺酮类药物进行测定，操作简单、定性定量分析准确，实现了对饲料中喹诺酮类药物的灵敏、快速、准确的测定。

技术领域

本发明涉及饲料检测技术领域，尤其是涉及一种饲料中喹诺酮类药物的检测方法。

背景技术

喹诺酮类药物是一类具有抗菌作用的人工合成药物，具有抗菌谱广、抗菌力强、毒副作用小、价格低廉等特点，作为饲料添加剂被广泛用于养殖业中，以预防和治疗畜禽和鱼类细菌感染性疾病。由于对药物知识了解不够，甚至为经济利益驱使，不规范用药、滥用兽药、饲料中违禁添加药物的情况屡见不鲜。饲料中的药物通过动物代谢经排泄物排出或直接进入水体而在土壤、水体、植物中残留，加之喹诺酮类药物本身具有一定毒性，其潜在的致癌性及致病菌耐药性产生，严重影响着人类的生存环境，最终影响人类的健康。因此，为确保动物源性食品质量安全，开发饲料中喹诺酮类药物残留的检测方法至关重要。

目前，喹诺酮类药物的检测方法主要有酶联免疫法、胶体金免疫层析法、电化学法、毛细管电泳-电化学发光法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、液相色谱-高分辨质谱法等。例如，在中国专利文献上公开的“一种兽药中喹诺酮类药物残留的检测方法”，其公告号CN106908560A，采用液相色谱-串联质谱法测定兽药中的喹诺酮类药物残留，方法测定底限为50μg/kg。

由于饲料中基质成分复杂，且待测的喹诺酮类药物含量低，因此要求检测方法具有良好的选择性和高灵敏度，而现有技术中的喹诺酮类药物的检测方法在灵敏度和准确性上仍有所不足，限制了在饲料检测中的应用。

发明内容

本发明是为了克服现有技术中的喹诺酮类药物的检测方法在灵敏度和准确性上仍有所不足，无法满足基质成分复杂且待测的喹诺酮类药物含量低的饲料检测要求的问题，提供一种饲料中喹诺酮类药物的检测方法，采用超高压液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用法对饲料中的喹诺酮类药物进行测定，操作简单、定性定量分析准确，实现了对饲料中喹诺酮类药物的灵敏、快速、准确的测定。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种饲料中喹诺酮类药物的检测方法，包括如下步骤：

(1)建立待测喹诺酮类药物的精确质量数据库和质谱谱库：配置待测喹诺酮类药物的标准溶液，采用超高压液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪确定待测喹诺酮类药物的精确质量数据库和质谱谱库；

(2)样品前处理：将饲料用甲酸乙腈溶液提取，提取液经分子印迹整体柱固相萃取并洗脱后得到前处理后的样品；

(3)样品检测：采用超高压液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪对前处理后的样品进行检测；

(4)结果分析：将样品检测结果与建立的精确质量数据库和质谱谱库进行对比分析，当检测结果与精确质量数据库和质谱谱库信息匹配时，则确定样品中检测出待测喹诺酮类药物。

作为优选，所述喹诺酮类药物包括氧氟沙星、诺氟沙星、二氟沙星、氟罗沙星、奥比沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、环丙沙星、培氟沙星、依诺沙星、司帕沙星、洛美沙星。

作为优选，步骤(1)中所述精确质量数据库包括各待测喹诺酮类药物的色谱保留时间及一个前体离子和对待测喹诺酮类药物分别施加不同的碰撞能量后响应强度最高的两个特征碎片离子的精确质量数；质谱谱库包括对待测化合物分别施加不同碰撞能量后产生的二级质谱图。