[发明专利]4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的高效液相色谱测定方法

说明书

本发明涉及一种4‑乙基‑2,3‑双氧哌嗪酰氯的高效液相色谱测定方法，属于药物分析技术领域。所述方法包括以下步骤：(1)高效液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；流动相：甲醇水溶液；流速：0.8‑1.2ml/min；柱温：室温；检测器波长：198‑210nm；进样体积：20uL；洗脱方式：等度洗脱；样品衍生化处理条件：有机胺类作为衍生化试剂；碱作为催化剂；无水乙醇为溶剂；反应条件为室温，反应时间为15‑25min；(2)分别配制4‑乙基‑2,3‑双氧哌嗪酰氯的对照样品溶液和供试品溶液；(3)制作标准曲线；(4)计算供试品的含量。本发明操作简单便捷，色谱峰形好，数据准确可靠，重现性好。

技术领域

本发明涉及一种4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的高效液相色谱测定方法，属于药物分析技术领域。

背景技术

4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯为淡黄色或白色针状结晶，极易吸潮分解，太阳光直接照射软化，易溶于水，可溶于二氯甲烷、氯仿及甲醇，不溶于石油醚及正己烷，在丙酮及水中分解。其分子式是C₇H₉ClN₂O₃，分子量为204.611，该物质是一种重要的医药中间体。其结构式为

4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯是合成哌拉西林、头孢哌酮等抗生素药物的一个重要前体，广泛应用于抗菌素药物的生产。毒性低微，较为安全，在国内市场销售上呈不断上升趋势。

目前报道的关于4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的测定方法主要有容量分析方法的银量法和气相色谱分析法。银量法测定4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯，滴定终点的判断以颜色变化为依据，存在很大的观察误差。气相色谱法的分离度高，灵敏度好，样品用量少，重复性好，直接气相法时，需要很高的汽化温度，在此温度下4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯很容易分解。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的高效液相色谱测定方法，操作简便快捷，色谱峰形好，数据准确可靠，重现性好，能够准确的测定4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的含量，对下游客户的使用起指导作用。

本发明所述的4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的高效液相色谱测定方法，包括以下步骤：

(1)高效液相色谱条件为：

色谱柱：C18色谱柱(规格为250×4.6mm，5μm)；

流动相：甲醇水溶液，甲醇与水的体积比为70-80:30-20，体积比优选70:30；

流速：0.8-1.2ml/min，优选1.0ml/min；

柱温：室温；

检测器波长：198-210nm，优选205nm；

进样体积：20uL；

洗脱方式：等度洗脱；

样品衍生化处理条件：有机胺类作为衍生化试剂，优选甲胺；碱作为催化剂，优选三乙胺；无水乙醇为溶剂；反应条件为室温，反应时间为15-25min，优选20min；

(2)分别配制4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的对照样品溶液和供试品溶液；

(3)制作标准曲线；

(4)计算供试品的含量。

通过试验，在最佳液相色谱条件下，4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的含量在0.2～1.0mg/ml的浓度范围内具有良好的线性关系，相关系数在0.999以上，采用空白基质匹配标准溶液的方法进行标准校正，显示4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯平均回收率在90％以上，相对标准偏差小于1.5％。该方法适用于测定4-乙基-2,3-双氧哌嗪酰氯的含量。

与现有技术相比，本发明的有益效果如下：