[发明专利]一种华盖木组培快繁方法

说明书

本发明提供了一种华盖木组培快繁方法，属于植物组培技术领域。本发明以消毒的华盖木幼嫩的顶芽或侧芽为外植体，通过在特定的培养基上依次诱导、分化、增殖与生根一系列培养，成功繁殖华盖木完整植株，有效解决了华盖木组培快繁、引种驯化、保护及其科研、园林绿化上的开发利用问题，同时有效避免野生资源自然消失与灭亡，维持自然界中种群数量，在华盖木的迁地保护、近地保护和就地保护所需种苗方面具有积极作用。本方法诱导分化率58％，繁殖周期60天，增殖系数为3.6，生根率为81％，移栽成活率为86％以上，极大地提高了华盖木的繁殖数量与生长速率，为该物种的保护与繁育、引种驯化、保存和规模化生产供了技术支撑。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种华盖木组培快繁方法。

背景技术

华盖木(Manglietiastrum sinicum)隶属于木兰科华盖木属，常绿大乔木，高可达40米左右，胸径1.2米，是中国云南特有种，起源于1.4亿年前，是木兰科中最古老的单属种植物之一，因其树干挺直光滑，树冠巨大而得名。华盖木是地质时代第三、四纪遗留下来的古老孑遗树种，1999年被列为国家一级重点保护野生植物，被世界自然保护联盟(IUCN)全球红色名录列为极度濒危物种。是典型的极小种群野生植物。最早发现于云南省西畴县法斗乡，生于海拔1300～1500米的山沟常绿阔叶林中。由于分布范围狭窄，且数量稀少而被称为“植物中的大熊猫”。经过反复多次野外调查，目前仅存47株大树，华盖木结果量少，种子量不多，并存在结果大小年的情况，自然繁殖和更新都较为困难。

迄今为止，现有技术没有关于华盖木组培快繁和相关的生物技术方面的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种华盖木组培快繁方法，填补华盖木生物技术上的空白，同时解决华盖木在野外分布区域狭窄、种群数量稀少、种子苗量不足的问题。

本发明提供了一种华盖木组培快繁的方法，包括以下步骤：

1)将消毒的华盖木幼嫩的顶芽或侧芽作为外植体接种至诱导与分化培养基中诱导分化培养，得到萌发的节芽；

所述诱导与分化培养基为包含0.5～3.0mg/L 6-BA、1.0mg/L IAA、30g/L蔗糖和5.0g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；

2)将所述萌发的节芽接种至增殖与继代培养基中增殖继代培养，得到增殖继代材料；所述增殖与继代培养基为包含0～2.0mg/L 6-BA、0.1～1.0mg/L IAA、30g/L蔗糖和5.0g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；3)将所述增殖继代材料接种至壮苗与生根培养中培养，得到壮苗生根材料；所述壮苗与生根培养基为包含0.1～2.0mg/L IBA、0.1～2.0mg/LIAA、30g/L蔗糖和5.0g/L琼脂的MS培养基，pH值为5.8；

4)将所述壮苗生根材料进行瓶苗移栽，得到华盖木植株。

优选的，所述诱导与分化培养基为包含2.0mg/L 6-BA、1.0mg/L IAA、蔗糖30g/L和琼脂5g/L的MS培养基，pH值为5.8。

优选的，所述增殖与继代培养基为包含1.0mg/L 6-BA、0.5mg/L IAA、蔗糖30g/L和琼脂5g/L的MS培养基，pH值为5.8。

优选的，所述壮苗与生根培养基为包含1.0mg/L IBA、1.0mg/L IAA、蔗糖30g/L和琼脂5g/L的MS培养基，pH值为5.8。

优选的，所述诱导分化培养、增殖继代培养或壮苗生根培养的条件如下：温度为23～30℃；培养周期为30～60d；

在培养期间进行光照；光暗周期比为10:14；所述光照的强度为1300～1800Lux。

优选的，步骤1)中所述消毒前先用洗涤液浸泡，经流水冲洗干净后进行外植体消毒；