[发明专利]一种适用于中国地区前交叉韧带损伤的基因诊断试剂盒

权利要求书

1.一种适用于中国地区前交叉韧带损伤的基因诊断试剂盒，其特征在于，包括PCR反应体系，所述PCR反应体系包含第一引物组和/或第二引物组，所述第一引物组包含如下引物序列：

上游引物：5’-ACGTCACTAAAATAAAATCCTGTCTA-3’；

下游引物：5’-GAAGCTCCAAGAAACCATCC-3’；

所述第二引物组包含如下引物序列：

上游引物COL12-F1 5’-GAG AAT CCA GAA CAG CTC CAC CAG-3’；

下游引物COL12-R1 5’-CAT GGC TAG TAT GGG ACA G-3’。

2.根据权利要求1所述的适用于中国地区前交叉韧带损伤的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述第二引物组还包含以下引物序列：

上游引物COL12-F2 5’-ACT TTT GCG TGG GTA TGT-3’；

下游引物COL12-R2 5'-CTC CAA AAC AAG TAG TAG C-3’。

3.根据权利要求2所述的适用于中国地区前交叉韧带损伤的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述PCR反应体系还包括10×PCR扩增缓冲液、dNTP、HostStart rTaq聚合酶、模板DNA。

4.根据权利要求3所述的适用于中国地区前交叉韧带损伤的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述试剂盒每一人份包括PCR反应体系20μL，其中，PCR反应体系包括10×PCR扩增缓冲液2.0μL、dNTP1.6μL、上游引物0.2μL、下游引物0.2μL、HostStart rTaq聚合酶0.1μL、模板DNA1.3μL，剩余由无菌双蒸水扩充至20μL；

PCR扩增反应的条件为：94℃预变形3min，94℃变性30s，58.9℃退火30s，72℃延伸2min，共30个循环，随后72℃延10min，最后4℃保存。

5.根据权利要求4所述的适用于中国地区前交叉韧带损伤的基因诊断试剂盒，其特征在于，所述第一引物组针对β-fib基因启动子区单核苷酸多态性位点；所述第二引物组中的COL12-F1及COL12-R1、COL12-F2及COL12-R2针对COL12A1基因外显子65区和29区的多态性位点。