[发明专利]一种离心式核提扩增一体化系统及检测方法

权利要求书

1.一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，包括离心式核提扩增一体化仪器（20）和进行核提扩增一体化反应的卡盒（10），所述卡盒（10）包括核酸处理区（1）和核酸检测区（2），所述核酸处理区（1）与所述核酸检测区（2）之间通过沟道连通，所述沟道中设有封堵的蜡阀（3）；

所述离心式核提扩增一体化仪器（20）上设有卡盒承托机构（4）、离心运动驱动装置（5）、温控反应机构（6）、光学检测机构（7）及电路控制系统。

2.根据权利要求1所述的一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，所述卡盒（10）上设有采用化学惰性材料注塑加工而成的储液端，所述储液端连接的沟道及开口密封采用惰性材料的膜片或玻片，所述密封的方式为粘胶、UV胶曝光或超声焊接。

3.根据权利要求1所述的一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，所述核酸检测区（2）的数量为一个或多个，所述核酸检测区（2）预埋有反应试剂，所述反应试剂的形态为干粉、冻干球或液态的反应体系。

4.根据权利要求1所述的一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，所述卡盒（10）在还包括废液区（10-1）和注液区（10-2）；所述注液区（10-2）与所述核酸处理区（1）及所述核酸处理区（1）与所述废液区（10-1）均通过沟道连通，所述沟道中设有封堵的蜡阀（3）；所述注液区（10-2）的数量为一个或多个，所述注液区（10-2）预埋有核提反应试剂，所述核提反应试剂的形态为干粉、冻干球或液态的反应体系。

5.根据权利要求1所述的一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，所述卡盒（10）可采用磁珠法或离心柱法的核酸提取及纯化；所述磁珠法核酸提取及纯化方式，所述离心式核提扩增一体化仪器（20）上设有与所述核酸处理区（1）的磁珠对位的磁珠吸附机构；所述离心柱核酸提取及纯化方式，所述核酸处理区（1）中部加入有离心柱。

6.根据权利要求1所述的一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，所述卡盒（10）固定于所述卡盒承托机构（4）上方，所述（4）至少承载两个所述卡盒（10），两个所述卡盒（10）以轴对称或中心对称的方式排布；

所述温控反应机构（6）位于卡盒承托机构（4）上方，所述卡盒（10）的核酸检测区（2）与所述温控反应机构（6）紧密接触，所述光学检测机构（7）固定于所述离心运动驱动装置（5）外侧。

7.根据权利要求1所述的离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，还包括融蜡机构，所述融蜡机构的采用接触式融蜡或非接触式融蜡；所述融蜡机构采用接触式融蜡，所述卡盒承托机构（4）上表面与所述卡盒（10）蜡阀的位置设有对应接触的温度控制点；所述非接触式融蜡方式，所述融蜡机构固定于离心机构外侧，可采用红外照射加热。

8.根据权利要求1所述的一种离心式核提扩增一体化系统，其特征在于，所述卡盒承托机构（4）以电路控制系统设定的转速进行离心式的旋转运动，所述卡盒（10）的每个所述核酸检测区（1）依次通过光学检测机构（7）进行光学信号检测。

9.一种离心式核提扩增一体化的检测方法，其特征在于，包括荧光检测方法和显色检测方法，

所述荧光检测方法中，所述光学检测机构（7）通过光纤（7-1）连接有检测光路，所述光纤（7-1）固定对准核酸检测区（1）的一周，所述核酸检测区（1）旋转经过所述光纤（7-1）的路径时，所述检测光路的激发光源发光进入所述核酸检测区（1）射入到检测器件，所述检测器件转换为电信号传输到电路控制系统；

所述显色检测方法中，激发光源及检测器件分别置于所述核酸检测区（1）的上侧和下侧或内侧和外侧，所述激发光源发出的光射入所述核酸检测区（1），经过显色体系吸收后的光射入到激发光源另一侧的检测器件。

10.根据权利要求9所述的一种离心式核提扩增一体化的检测方法，其特征在于，在所述荧光检测方法中，所述激发光源及所述检测器件分别置于与所述核酸检测区（1）所在圆周的不同方向，所述激发光斜射入所述核酸检测区（1），发出的光经过滤片射入到另一方设置的检测器件；

在所述显色检测方法中，所述激发光源与所述检测器件的设置有角度，所述激发光源发出的光射入所述核酸检测区（1），经过显色体系吸收后的光射入到检测器件；

在所述荧光检测方法中，所述光学检测机构（7）至少进行一个光学通道的检测。