[发明专利]一种离心式核提扩增一体化系统及检测方法

说明书

本发明公开了一种离心式核提扩增一体化系统，包括离心式核提扩增一体化仪器和进行核提扩增一体化反应的卡盒，卡盒包括核酸处理区和核酸检测区，核酸处理区与核酸检测区之间通过沟道连通，沟道中设有封堵的蜡阀；离心式核提扩增一体化仪器上设有卡盒承托机构、离心运动驱动装置、温控反应机构、光学检测机构及电路控制系统；系统操作简单、体积小、自动化程度高；只需手工加入样本，系统便可全自动流程运行，整个过程仪器是无液体操作；无需手动对提取物进行转移，避免交差污染；降低结果假阳性的风险。

技术领域

本发明涉及生物医学基因分析仪器技术领域，具体来说，涉及一种离心式核提扩增一体化系统及检测方法。

背景技术

核酸提取及聚合酶链反应（PCR）是分子生物学常用的分析手段。一直以来，传统核酸提取及PCR都在分立的仪器中进行，实验人员在做完样本前处理后，需要手工进行核提的上样，并在核提结束后，手工配制PCR实验体系，上机检测，整个流程下来，至少需要半天时间，分析检测时间过长，浪费时间和人力。

另外，核提及PCR的分立流程容易导致交叉污染及环境污染，带来检测结果的假阳性，影响结果分析，有鉴于此，急需开发一款集核酸提取、PCR扩增检测于一体的系统。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出一种离心式核提扩增一体化系统，能够克服现有技术的上述不足，可以缩短分析检测时间，减少了交叉污染的可能性，检测结果更准确。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：一种离心式核提扩增一体化系统及检测方法，包括离心式核提扩增一体化仪器和进行核提扩增一体化反应的卡盒，所述卡盒包括核酸处理区和核酸检测区，所述核酸处理区与所述核酸检测区之间通过沟道连通，所述沟道中设有封堵的蜡阀；

所述离心式核提扩增一体化仪器上设有卡盒承托机构、离心运动驱动装置、温控反应机构、光学检测机构及电路控制系统。

进一步地，所述卡盒上设有采用化学惰性材料注塑加工而成的储液端，所述储液端连接的沟道及开口密封采用惰性材料的膜片或玻片，所述密封的方式为粘胶、UV胶曝光或超声焊接。

进一步地，所述核酸检测区的数量为一个或多个，所述核酸检测区预埋有反应试剂，所述反应试剂的形态为干粉、冻干球或液态的反应体系。

进一步地，所述卡盒在还包括废液区和注液区；所述注液区与所述核酸处理区及所述核酸处理区与所述废液区均通过沟道连通，所述沟道中设有封堵的蜡阀；所述注液区的数量为一个或多个，所述注液区预埋有核提反应试剂，所述核提反应试剂的形态为干粉、冻干球或液态的反应体系。

进一步地，所述卡盒可采用磁珠法或离心柱法的核酸提取及纯化；所述磁珠法核酸提取及纯化方式，所述离心式核提扩增一体化仪器上设有与所述核酸处理区的磁珠对位的磁珠吸附机构；所述离心柱核酸提取及纯化方式，所述核酸处理区中部加入有离心柱。

进一步地，所述卡盒固定于所述卡盒承托机构上方，所述至少承载两个所述卡盒，两个所述卡盒以轴对称或中心对称的方式排布；

所述温控反应机构位于卡盒承托机构上方，所述卡盒的核酸检测区与所述温控反应机构紧密接触，所述光学检测机构固定于所述离心运动驱动装置外侧。

进一步地，还包括融蜡机构，所述融蜡机构的采用接触式融蜡或非接触式融蜡；所述融蜡机构采用接触式融蜡，所述卡盒承托机构上表面与所述卡盒蜡阀的位置设有对应接触的温度控制点；所述非接触式融蜡方式，所述融蜡机构固定于离心机构外侧，可采用红外照射加热。

进一步地，所述卡盒承托机构以电路控制系统设定的转速进行离心式的旋转运动，所述卡盒的每个所述核酸检测区依次通过光学检测机构进行光学信号检测。

在本发明的另一方面，提供一种离心式核提扩增一体化的检测方法，包括荧光检测方法和显色检测方法；