[发明专利]一种鸡骨常山种苗的组培快繁和离体保存方法有效
| 申请号： | 202011172234.6 | 申请日： | 2020-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN112119915B | 公开（公告）日： | 2021-11-19 |
| 发明（设计）人： | 李春芳;何俊;杨俊波 | 申请（专利权）人： | 中国科学院昆明植物研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;A01N3/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 苏士莹 |
| 地址： | 650201 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 常山 种苗 组培快繁 保存 方法 | ||
1.一种鸡骨常山种苗的组培快繁和离体保存方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将消毒后的幼嫩侧芽茎段为外植体，将所述外植体转移至初代培养基上进行初代培养，得无菌新芽；所述初代培养基由MS培养基、6-BA0.5mg/L、NAA0.2mg/L、蔗糖20g/L和琼脂5.6g/L组成，pH值为5.8；
(2)将所述无菌新芽转到增殖培养基上继续培养，得丛生芽；所述增殖培养基由MS培养基、6-BA0.3～1.0mg/L、IAA0.2mg/L、蔗糖20g/L和琼脂5.6g/L组成，pH值为5.8；
(3)将所述丛生芽切割成单芽后接种于生根培养基上进行生根培养，得生根组培苗；所述生根培养基由1/2MS培养基、IAA0.1～1.0mg/L、蔗糖20g/L和琼脂5.6g/L组成，pH值为5.8；得到生根组培苗后，待所述生根组培苗生根2～4条、根长2～3cm时进行移栽，所述移栽前还包括炼苗，所述移栽的移栽基质为腐叶土和生红土的混合基质，所述腐叶土和生红土的体积比为1： 1；
(4)将所述生根组培苗转移至离体保存培养基上进行离体保存；所述离体保存培养基由1/2MS培养基、IAA1.0mg/L、蔗糖20g/L和琼脂5.6g/L组成，pH值为5.8；
步骤(1)所述初代培养、步骤(2)所述继续培养、步骤(3)所述生根培养和步骤(4)所述离体保存的温度均为25±3℃，光照强度均为20～40μmol/(m2·s)，光照时间均为12h/d。
2.根据权利要求1所述组培快繁和离体保存方法，其特征在于，步骤(1)所述消毒包括：将幼嫩的侧芽茎段浸泡在肥皂水中，经自来水冲洗1h后，于无菌环境中剪成带单个芽的茎段，用体积百分含量为75％的酒精消毒10s，无菌水冲洗3遍，用质量百分含量为0.1％的升汞溶液进行表面消毒6～8min，无菌水清洗3～5次。
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