[发明专利]一种验证内生共生菌的方法

权利要求书

1.一种验证内生共生菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：验证内生共生菌的装置；

基础装置：由玻璃广口瓶，上有玻璃钟罩，玻璃广口瓶，瓶口置放塑料瓶塞；

备用材料：可严密封闭广口瓶瓶口的凡士林等物质；用于钟罩内抽气的干燥机；

S2：培育无菌的水稻菌；

将水稻种籽进行冲洗，然后用无菌水清洗三次；

S3：供试菌株进行放射双抗处理：将供试菌株用钴60放射处理，将供试菌株在抗生素链霉素利福平中，从低浓度逐渐培育成抗两种抗菌素浓度达200ppm；

S4：将无菌稻苗置放在经过消毒的广口瓶内，将含有营养液的供试放射标志抗两种抗菌素的芽孢杆菌加在广口瓶内，营养菌液溢过水稻根部；

S5：将供试广口瓶瓶口严密密闭，避免出现水膜存在，避免广口瓶内的芽孢杆菌绝从下部通过茎杆表面通过瓶塞传到瓶塞上部；

S6：瓶塞上部钟罩内，进行抽气干燥，不允许上部茎叶有任何水膜存在，不允许有任何供试菌在茎叶表面有水膜存在；

S7：五天后，在供试水稻苗顶端叶尖上可检查供试芽孢杆菌。

(1)放射双抗芽孢杆菌共有钴60放射标志并且在200ppm链霉素利福平两种抗生素培养的试剂上生长；

(2)本试验设将供应菌杀死后，做对照。对照在上部叶尖处没有放射性标志，并抗两种抗素菌的芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的一种验证内生共生菌的方法，其特征在于：在所述S2步骤中，清洗后的水稻种籽置放无菌营养液中室温培养成苗，备用。

3.根据权利要求1所述的一种验证内生共生菌的方法，其特征在于：在所述S3步骤中供试菌株是芽孢杆菌。