[发明专利]一种氯法拉滨修饰的寡聚核苷酸

说明书

本发明涉及药物化学领域，特别是涉及一种氯法拉滨修饰的寡聚核苷酸。本发明提供一种氯法拉滨修饰的寡聚核苷酸，包括核酸适配体片段，所述核酸适配体片段修饰有氯法拉滨亚磷酰胺单体基团。本发明将核苷药物氯法拉滨和/或吉西他滨设计合成为可用于固相合成的亚磷酰胺单体，使用固相合成技术实现氯法拉滨和/或吉西他滨对寡聚核苷酸上的定点精准功能化，制备获得的氯法拉滨和/或吉西他滨修饰的寡聚核苷酸可以在核酸酶的作用下释放氯法拉滨，对肿瘤细胞仍具有较高的细胞毒性，保留了氯法拉滨和/或吉西他滨的药物活性，具有良好的产业化前景。

技术领域

本发明涉及药物化学领域，特别是涉及一种氯法拉滨修饰的寡聚核苷酸。

背景技术

氯法拉滨是一种嘌呤核苷抗代谢药，与其他嘌呤核苷类似物不同的是氯法拉滨的嘌呤环中存在氯，核糖部分中存在氟。氯法拉滨通过干扰核酸的合成来阻止细胞产生DNA和RNA，从而阻止癌细胞的生长。氯法拉滨通过脱氧胞苷激酶在细胞内代谢为活性5'-单磷酸代谢物，并通过单和二磷酸激酶代谢为5'-三磷酸代谢物。从而达到对核糖核苷酸还原酶的抑制作用，以及终止DNA链的延伸并通过竞争性抑制DNA聚合酶来抑制修复，进而抑制了DNA的合成。在临床前模型中，氯法拉滨已显示出通过在修复过程中掺入DNA链来抑制DNA修复的能力。氯法拉滨5'-三磷酸酯还破坏线粒体膜的完整性，导致促凋亡线粒体蛋白，细胞色素C和凋亡诱导因子的释放，导致程序性细胞死亡。目前，氯法拉滨已在全球多个国家被批准用于儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床治疗。

寡聚核苷酸是短的单链或双链DNA或RNA分子，在分子生物学中正发挥着越来越重要的作用，其可以用于核酸序列检测的探针、单碱基多样性分析、反义寡聚核苷酸等，是一种非常有效的研究工具。通过对寡聚核苷酸进行功能化修饰，可以赋予寡聚核苷酸新的功能，拓宽寡聚核苷酸的应用范围。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种氯法拉滨修饰的寡聚核苷酸，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种氯法拉滨修饰的寡聚核苷酸，包括核酸适配体片段，所述核酸适配体片段修饰有氯法拉滨亚磷酰胺单体基团。

在本发明一些实施方式中，所述核酸适配体片段修饰有一个或多个氯法拉滨亚磷酰胺单体基团，所述氯法拉滨亚磷酰胺单体基团修饰于核酸适配体片段的5’端和/或修饰于核酸适配体片段的3’端和/或添加于核酸适配体片段的中间。

在本发明一些实施方式中，所述氯法拉滨亚磷酰胺单体基团与核酸适配体片段之间通过磷酸二脂键连接。

在本发明一些实施方式中，修饰于核酸适配体片段的5’端的氯法拉滨亚磷酰胺单体基团的化学结构式如下所示：

添加于核酸适配体片段的中间的氯法拉滨亚磷酰胺单体基团的化学结构式如下所示：

修饰于核酸适配体片段的3’端的氯法拉滨亚磷酰胺单体基团的化学结构式如下所示：

在本发明一些实施方式中，所述核酸适配体片段还修饰有吉西他滨亚磷酰胺单体基团。

在本发明一些实施方式中，所述核酸适配体片段修饰有一个或多个吉西他滨亚磷酰胺单体基团，所述吉西他滨亚磷酰胺单体基团修饰于核酸适配体片段的5’端和/或修饰于核酸适配体片段的3’端和/或添加于核酸适配体片段的中间。

在本发明一些实施方式中，所述吉西他滨亚磷酰胺单体基团与核酸适配体片段之间通过磷酸二脂键连接。

在本发明一些实施方式中，修饰于核酸适配体片段的5’端的吉西他滨亚磷酰胺单体基团的化学结构式如下所示：