[发明专利]制备免疫细胞的方法、免疫细胞和治疗肿瘤的药物

权利要求书

1.一种制备嵌合抗原受体修饰的免疫细胞的方法，其特征在于，其包括如下步骤中的任意一种：

步骤(a)：沉默或抑制所述免疫细胞的TIPE2基因表达；

步骤(b)：使所述免疫细胞的TIPE2基因表达的TIPE2蛋白失活。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，通过往所述免疫细胞内导入抑制分子的方式以使TIPE2基因的表达被沉默或抑制；

所述抑制分子选自shRNA、反义RNA和siRNA中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述抑制分子为shRNA，所述抑制分子的靶序列选自SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.6和SEQ ID NO.9；

优选的，所述抑制分子的靶序列为SEQ ID NO.1。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述shRNA的碱基序列如SEQ ID NO.12所示。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中，通过敲除或突变所述免疫细胞的TIPE2基因的方式以使其表达的TIPE2蛋白失活。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述免疫细胞选自T细胞、NK细胞、细胞毒性T淋巴细胞、调节T细胞、记忆性T细胞、双特异性T细胞和CIK细胞中的任意一种；

优选地，所述免疫细胞源自哺乳动物；

优选地，所述免疫细胞源自人；

优选地，当所述免疫细胞源自非人哺乳动物时，所述TIPE2基因为人TIPE2基因的同源基因。

7.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有能够特异性结合肿瘤相关抗原的抗原结合结构域、跨膜结构域和共刺激信号传导区；

优选的，所述肿瘤相关抗原选自CD19、CD20、CD22、CD23、CD30、CD33、CD123、CD138、CD171、BCMA、CD38、NKG2D配体、MUC-1、MUC16、LeY、CEA、Mesothelin、CAIX、CD123、ROR1、间皮蛋白、c-Met、EGFR、ERBB2、ERBB3、ERBB4、Claudin18.A2、PLAC1、GD2、PDGFR、MAGE4、GPC3、PSCA、EpCAM、PSMA、LMP1、EGFRvIII、GD-2、NY-ESO-1、IL-13Rα2、EphA2、FAP、EGFRVIII、HER2、IL13R和MAGE-A3中的至少一种；

优选的，所述跨膜结构域选自CD8、CD28、CD33、CD37、CD8α、CD5、CD16、ICOS、CD9、CD22、CD134、CD137、CD154、CD19、CD45、CD4和CD3ε中的一种或多种的跨膜结构域；

优选地，所述共刺激信号传导区包含共刺激分子的细胞内结构域，所述共刺激分子选自CD27、CD3ζ、CD3γ、CD3δ、CD3ε、CD5、CD22、CD79a、CD79b、CD66d、CD2、CD4、CD5、CD28、CD30、CD40、CD134、CD137、ICOS、CD154、4-1BB、OX40、CD7、LIGHT、NKG2C和B7-H3中的一种或多种。

8.一种抗肿瘤效应增强的免疫细胞，其特征在于，所述免疫细胞修饰有靶向肿瘤相关抗原的嵌合抗原受体，且所述免疫细胞的TIPE2基因的表达被沉默或抑制，或者其表达的TIPE2蛋白失活。