[发明专利]具有改进特异性的修饰的T淋巴细胞

说明书

本文涉及具有改进特异性的修饰的T淋巴细胞，提供包含嵌合受体的修饰T的淋巴细胞及其使用方法。

1.相关申请

本申请为2014年2月6日提交的、发明名称为“具有改进特异性的修饰的T淋巴 细胞”、申请号为201480020004.4的中国发明专利申请的分案申请。

本申请要求2013年2月6日提交的美国专利申请号61/761,548的优先权，其公开内容通过引用以其整体结合到本文中。

2.发明领域

本文的公开内容涉及免疫学领域，更具体地讲，涉及T淋巴细胞或其它免疫细胞的修饰。

3.发明背景

免疫系统的细胞例如T淋巴细胞(亦称为T细胞)通过受体或受体复合体识别并与特 定的抗原相互作用，其在识别或与所述抗原相互作用时引起细胞活化。所述受体的实例是抗原特异性T淋巴细胞受体复合体(TCR/CD3)，一种8种蛋白质的复合体。T细胞受 体(TCR)在T淋巴细胞的表面上表达。一种成分CD3，其具有不变结构，在TCR被配 体占据后，负责胞内信号转导。抗原-CD3复合体(TCR/CD3)的T淋巴细胞受体识别由 主要组织相容性复合体(MHC)的蛋白质呈递给它的抗原肽。MHC和肽的复合体在抗原 呈递细胞和其它T淋巴细胞靶的表面上表达。刺激TCR/CD3复合体导致T淋巴细胞的 活化和随之发生的抗原特异性免疫应答。TCR/CD3复合体在效应子功能和免疫系统调 节中起重要作用。

T淋巴细胞需要第二协同刺激以变成完全活性的。在没有这种信号的情况下，T淋巴细胞对结合TCR的抗原不起反应，或变得无反应性。这类协同刺激信号由例如CD28 (一种T淋巴细胞蛋白质)提供，其与抗原呈递细胞上的CD80和CD86相互作用。ICOS (可诱导共刺激分子(Inducible COStimulator))，另一种T淋巴细胞蛋白质，当与ICOS配 体结合时提供协同刺激信号。

TCR复合体的必需抗原结合、信号转导和刺激功能通过遗传重组方法被简化为单一 多肽链，通常称为嵌合抗原受体(CAR)。参见例如Eshhar，美国专利号7,741,465；Eshhar， 美国专利申请公布号2012/0093842。携带所述CAR的T淋巴细胞一般称为CAR-T淋巴 细胞。然而，虽然所述CAR有效地使T淋巴细胞靶向特异性肿瘤相关抗原或肿瘤特异 性抗原，并可有效地靶向T淋巴细胞以杀死表达所述抗原的肿瘤细胞，这类设计遇到指 导T淋巴细胞杀死同样表达所述抗原的正常健康细胞的严重副作用。因此，所述CAR-T 淋巴细胞的使用一般限于表达机体中的任何其它细胞都不表达的抗原的肿瘤，这是一种 相对罕见情况。

本文描述了克服现行CAR设计的这个缺点的包含嵌合受体的修饰的T淋巴细胞。

4.发明概述

第一个方面，本文提供修饰的淋巴细胞，例如包含至少两种不同的多肽(例如嵌合受体)的修饰的T淋巴细胞，其中来源于第一多肽(例如嵌合受体)与第一抗原结合的免疫信号与由第二多肽(例如嵌合受体)产生的协同刺激信号相分开，且其中协同刺激信号依赖于第二抗原被第二嵌合受体的抗原结合。如本文全文中所用，“第一多肽”表示产生一 级抗原结合免疫信号的多肽，“第二多肽”是产生协同刺激免疫信号的多肽。在某些实施 方案中，使用单个CAR构建体，将两种多肽(例如嵌合受体)导入修饰的T淋巴细胞中， 其中该多肽被允许两个分立的多肽(以基本相等的量)从单一ORF中表达的可切割序列 (T2A或P2A)分隔开。