[发明专利]一种用马来氏网结合高通量测序调查昆虫多样性的方法

说明书

本发明公开一种用马来氏网结合高通量测序调查昆虫多样性的方法，属于昆虫多样性研究技术领域。本发明所述方法为先通过马来式网收集昆虫，然后对收集的全部昆虫进行总DNA的提取，后通过高通量测序技术获得所有昆虫的DNA序列，经NCBI Blast数据库进行序列比对，从而对所获得昆虫进行鉴定。通过Alpha多样性和Beta多样性来分析各收集点昆虫的群落结构、多样性及优势物种。本发明所述方法可以对油茶林、茶园进行昆虫多样性的实时、有效及全面的调查，以便掌握害虫发生动态及害虫与天敌间的关系。

技术领域

本发明涉及一种用马来氏网结合高通量测序调查昆虫多样性的方法，属于昆虫多样性研究技术领域。

背景技术

昆虫多样性作为生物多样性的重要组成部分，在维持生态平衡、生物防治、植物传粉、医药保健和轻工业原料等方面发挥着重要作用；在我国建立的保护区中，昆虫是可以有效利用的宝贵资源，但是它同时也是危害农林生产重要的一部分，需要重点的关注和防范，了解景区昆虫区系的组成和分布情况，有利于开展研究和保护项目；现有技术有很多的昆虫收集方法与鉴定技术。

昆虫的收集方法主要取决于采样对象和采样环境的不同，还要考虑到人力和经费问题。可供选择的采样方法有很多，在此例举一些常见的陆地昆虫采集方法，针对一些特殊生境生活的昆虫，需要根据不同的情采用特殊的采集方法。比如，(1)灯光诱捕夜晚趋光性的昆虫(主要是鳞翅目)；(2)扫集法，特制的扫网接触植被，适于捕捉植被中的昆虫；(3)网集法，使用捕虫网捕捉昆虫的最常用的方法；(4)吸虫器法适用于寄生蜂多样性的研究和系统监测；(5)振频式杀虫灯，杀虫种类广，可诱杀多种蔬菜害虫(6)马来氏网，收集日出性和部分夜出性膜翅目和双翅目昆虫，主要靠拦截具有向光性的飞行昆虫，并引导其向上爬入收集瓶来完成诱集。

昆虫的鉴定技术大致分为形态鉴定和DNA分子鉴定；形态鉴定是通过昆虫形态结构与特征进行鉴定，DNA分子鉴定有第二代测序技术、高通量测序技术等。第二代测序技术主要是个体的测序鉴定；高通量测序技术，高通量技术可对数百万个DNA分子进行同时测序鉴定。

现有大部分的昆虫多样性研究都是先在研究地进行昆虫的收集，其后利用形态鉴定的方法分析多样性，如物种丰富度指数、多样性指数、均匀度、物种优势度等。现有技术多利用形态鉴定昆虫种类，鉴定方法比较原始会浪费大量时间在鉴定上，并且鉴定不准确。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用马来氏网结合高通量测序调查昆虫多样性的方法，可实现大尺度、实时有效的昆虫多样性监测，迅速掌握害虫的发生动态，具体包括以下步骤：

(1)针对实施地点面积布点，设计25m*25m的样方，在每个样方的中心点安放一个马来氏网；马来氏网的主要部件收集瓶分为上下两个部分，上部与网体联通，下部装3/4无水乙醇，每14天收集一次昆虫，重新更换无水乙醇。