[发明专利]一种具有降低尿酸活性的参膏及其制备方法在审
申请号: | 202011179673.X | 申请日: | 2020-10-29 |
公开(公告)号: | CN112138033A | 公开(公告)日: | 2020-12-29 |
发明(设计)人: | 陈友文;奚丹 | 申请(专利权)人: | 光亚生物科技(广州)有限公司 |
主分类号: | A61K36/258 | 分类号: | A61K36/258;A61K9/06;A61P19/06;A23L33/10;A23L33/105 |
代理公司: | 天津合正知识产权代理有限公司 12229 | 代理人: | 王雨杰 |
地址: | 510700 广东省广州市黄埔区广州国*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 降低 尿酸 活性 及其 制备 方法 | ||
1.一种具有降低尿酸活性的参膏,其特征在于:所述参膏中Compound K和20(S)-F2的含量占人参总皂苷比例的1%以上。
2.权利要求1所述的所述的参膏的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1.筛选菌种:筛选出同时能产生葡萄糖苷酶、吡喃阿拉伯糖苷酶、呋喃阿拉伯糖苷酶的菌种;
S2.制备酶液:对筛选出的菌种进行培养,并制得含有步骤S1的葡萄糖苷酶、吡喃阿拉伯糖苷酶、呋喃阿拉伯糖苷酶的酶液;
S3.提取:采用醇水混合提取或全水提的方式提取原料参中的人参皂苷;
S4.酶转化:将S3步骤提取出来的人参皂苷与S2步骤制备的酶混合,反应10~48h,使天然的二醇类皂苷转化生成20(S)-F2和Compound K,反应结束后,将温度升至90~150℃,保持5~40min,灭酶后温度降至50~70℃;
S5.制膏:将S3步骤提取的水溶性成分与S4灭酶后的含有Compound K和20(S)-F2的参膏混合,搅拌均匀,浓缩至55Brix以上,即为产品。
3.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述步骤S1的菌种从自然界中筛选得到,具体步骤为:
(1)从人参属植物种植地里含枯死的人参组织的土壤中接菌至平板培养基中培养;
(2)挑选出单一菌落的霉菌;
(3)对单菌落菌人参培养基中进行培养,
(4)检测对人参皂苷PPD混合物水解生成Compound K和20(S)-F2的酶活力,筛选出同时能产生葡萄糖苷酶、吡喃阿拉伯糖苷酶、呋喃阿拉伯糖苷酶且酶活力最佳的菌。
4.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述步骤S1的菌种为黑曲霉、米曲霉或米根霉。
5.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述步骤S2的酶液采用液体发酵培养制得,具体步骤为:制备好液体培养基后接菌发酵培养,培养过程摇瓶或者通入无菌空气,于28~35℃培养7~14d后,离心或过滤除去菌体,上清液为酶液。
6.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述步骤S2的酶液采用固体发酵培养制得,具体步骤为:将筛选出来的菌接入灭好菌的人参培养基中,于28-33℃培养4~8d后,用2~4倍的pH4.5-6.5的缓冲液浸泡、过滤,上清液为酶液。
7.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:当采用液体发酵培养时,所述步骤S2中的液体培养基为固体发酵培养基用5~10倍水95~100℃提取1~3h的提取物,用水调节可溶性固形物含量为5~12Brix,灭菌后使用;优选地,所述步骤S1中的平板培养基为加入5%的人参水提物的察氏培养基;优选地,当采用固体发酵培养时,所述步骤S2中的人参培养基为1~30%的人参属植物根、茎叶或花粉末或其提取物以及0~30%的麦草、0~30%的麦麸、0~15%的槐花、0~15%的豆粕、0~5%的稻壳,40~60%的水,经搅拌均匀并灭菌后使用。
8.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述S2步骤制备的酶液用硫酸铵、乙醇中的一种沉淀,收集酶含量高的沉淀部分,再用原酶液量5~15%的缓冲液溶解。优选地,所述缓冲液为0.001~0.1M的醋酸缓冲液、磷酸缓冲液或柠檬酸缓冲液中的一种。
9.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中醇水混合提取的步骤为:
(1)用70~95%的食用酒精对原料参中的人参皂苷进行提取,于40~70℃提取3~8h,过滤,重复2~3次,合并提取液;
(2)用40~50%浓度的食用酒精于40~70℃提取4~8h1~2次,过滤后滤液与上步提取液混合后,浓缩至固形物含量为50~70Brix,
(3)加原料参量的1~5倍水,继续浓缩,重复1~3次以降低乙醇含量,得到富含天然人参皂苷的组分;
(4)将上步提取过的滤渣上步提取的滤渣用5~10倍水加热至90~100℃提取5~8h,重复2~3次,合并提取液并浓缩。
10.权利要求1所述的参膏的制备方法,其特征在于:所述步骤S3中全水提的步骤为:
(1)用6~12倍原料参量的水与原料参混合在70~100℃之间提取1~8h,重复2~3次得到含有天然人参皂苷的混合液;
(2)用6~10倍水将混合液我在90~100℃之间提取6~12h,重复1~2次,提取出皂苷含量低的富含多糖的组分。
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