[发明专利]一种循环肿瘤细胞的分离方法

权利要求书

1.一种循环肿瘤细胞的分离方法，其特征在于，采用膜分离技术进行分离。

2.根据权利要求1所述循环肿瘤细胞的分离方法，其特征在于：含循环肿瘤细胞的细胞培养液在压力差作用下依据尺寸筛分原理被分离膜截留，实现循环肿瘤细胞的分离。

3.一种循环肿瘤细胞分离膜，其特征在于，使用多孔膜作为支撑体，甘草酸为分散剂，聚丙烯酰胺为膜材料，通过加入交联剂进行反应制得。

4.权利要求3所述循环肿瘤细胞分离膜的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：

步骤1：铸膜液的配制

将甘草酸与去离子水混合后加热溶解至溶液澄清；加入交联剂并搅拌均匀；然后边搅拌边加入聚丙烯酰胺；继续加热至溶液完全混合均匀；

步骤2：基底支撑体的预处理

将大孔径多孔支撑体用去离子水和乙醇轮流超声处理若干次，去除支撑体上的残留杂质；

步骤3：在支撑体上抽滤制膜

在抽滤条件下，使铸膜液缓慢滴落，在支撑体上抽滤成膜，烘干，得到分离膜。

5.根据权利要求4所述循环肿瘤细胞分离膜的制备方法，其特征在于，步骤1铸膜液中的甘草酸浓度为0.02-20mg/ml，交联剂浓度为0.1-40mg/ml，聚丙烯酰胺浓度为0.001-16mg/ml。

6.根据权利要求4所述循环肿瘤细胞分离膜的制备方法，其特征在于，交联剂为戊二醛，正硅酸四乙酯，十六烷基硅氧烷中的任意一种。

7.根据权利要求4所述循环肿瘤细胞分离膜的制备方法，其特征在于，支撑体为陶瓷，PVDF，PTFE，PP，尼龙N66多孔支撑体中的任意一种，孔径为1-10μm。

8.根据权利要求4所述循环肿瘤细胞分离膜的制备方法，其特征在于，步骤3中烘干温度为40-65℃，烘干时间为1-4h。