[发明专利]一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备及应用

权利要求书

1.一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌，其特征在于：所采用的有益微生物菌是解淀粉芽孢杆菌，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.6462。

2.根据权利要求1所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备，其特征在于：包括以下步骤：

①菌株活化，在无菌环境下将低温保藏的解淀粉芽孢杆菌接种于平板培养基，在9℃下进行活化培养，培养12h后制得活化孢子液；

②扩增培养，将步骤①制得的孢子液进行接种于液体培养基中，进行扩增培养，在20℃下培养至对数成长期后制得活化孢子液菌落；

③发酵培养，将步骤②制得的活化孢子液菌落按照5％比例接种于发酵罐中，在恒温26℃，恒速200r/min，发酵培养24h，制得发酵液；

④超滤浓缩，首先将超滤膜进行酸洗和碱洗，再进行无菌化处理，当完成上述所有步骤后，将步骤③制得的发酵液，使用超滤膜进行过滤，多次过滤后得到超滤浓缩液和低浓度滤液，超滤浓缩液活孢子数≥1000亿/g，低浓度滤液可以通过二次发酵进行重复利用，提高菌种利用率；

⑤喷雾干燥，将步骤④过滤得到的超滤浓缩液加入到干燥罐中进行喷雾干燥处理，实时观测其水分含量，当水分含量低于设定值时，停止干燥，冷却得到解淀粉芽孢杆菌固体，将其粉碎至75目。

3.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备，其特征在于：所述步骤①中所述的平板培养基的组成成分及其质量百分比：蛋白胨5.0％，酵母浸膏3.0％，氯化钠1.0％，琼脂粉2.0％，余量为水。

4.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备，其特征在于：所述步骤②中所述的液体培养基的组成成分及其质量百分比：蛋白胨3.0％，氯化钠1.0％，磷酸二氢钾0.5％，余量为水。

5.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备，其特征在于：所述步骤③中所述的发酵培养基的组成成分及其质量百分比：胰蛋白胨5.0％，酵母浸膏2.0％，葡萄糖1.0％，无水硫酸镁0.5％，醋酸钠1.0％，磷酸二氢钾0.3％，余量为水。

6.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备，其特征在于：所述步骤④中采用盐酸浸泡酸洗调整超滤膜流速，氢氧化钠浸泡碱洗用于中和酸洗。

7.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的制备，其特征在于：所述步骤⑤中喷雾干燥，所采用的喷雾干燥其温度在45℃恒定，喷雾速度为20L/h，设定的含水量为5wt％。

8.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的应用，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌主要用于防治烟草青枯病和防治烟草花叶病等。

9.根据权利要求2所述的一种能够防治烟草青枯病的解淀粉芽孢杆菌的应用，其特征在于：使用方法为：将一种解淀粉芽孢杆菌菌粉，按照1：200比例与水充分混合后，结合灌根技术和喷淋等现代农业技术，对烟草进行培育。