[发明专利]基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法

权利要求书

1.一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法，包括免疫层析试纸条和预固定Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物的离心管，其特征在于：所述的预固定Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物的离心管的制备方法包括如下步骤：

(1)Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt的制备：将Fe₃O₄分散于Tris-HCl缓冲溶液中，加入盐酸多巴胺，搅拌反应后磁分离洗涤得Fe₃O₄@PDA，然后将Fe₃O₄@PDA复溶至聚乙烯吡咯烷酮溶液中，加入抗坏血酸、氯钯酸钠和氯铂酸钾，加热反应，磁分离洗涤即得Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt；

(2)Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体的制备：向制得的Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt中加入待标记抗体，混匀后，4℃反应过夜，之后，加入封闭剂，室温反应2h，磁分离取沉淀，得到的沉淀复溶，制成Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物；

(3)预固定Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物的离心管：取上述步骤制得的Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物加入至离心管中，30℃下真空干燥即可。

2.根据权利要求1所述的一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法，其特征在于，所述步骤(2)中的Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt在加入待标记抗体前可进行预处理，预处理的步骤包括：将步骤(1)得到的Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt超声1～10min，再用0.01～0.5M pH 6.0～8.0的硼酸盐缓冲液调节Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt浓度至0.01～0.1mg/mL。

3.根据权利要求1所述的一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法，其特征在于，所述步骤(2)中加入待标记抗体后的抗体终浓度为1～100μg/mL，加入封闭剂后封闭剂的终浓度为0.1～1％，且所述封闭剂选自酪蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白、聚乙二醇、脱脂牛奶中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法，其特征在于，所述步骤(2)中磁分离后的沉淀用0.01～0.1M pH 6.0～9.0的磷酸盐缓冲液复溶为起始体积的1倍至1/10倍，即可制成聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶标记抗体复合物，并可于4℃保存备用。

5.根据权利要求1所述的一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法，其特征在于，所述Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记的抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体、纳米抗体。