[发明专利]基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法

说明书

本发明开发了一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶的快检新方法，在免疫层析试纸条底板上依次搭接粘贴滤纸、样本垫、喷涂有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水纸，制成免疫层析试纸条，然后在离心管底固定Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物，通过磁分离富集目标物，之后以试纸条定量检测样本中的待测物浓度，该方法可超灵敏检测待检物，同时减少样品基质的干扰。

技术领域

本发明属于医学检验和食品安全检测领域，具体涉及一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶(Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt)的快检新方法，来定量检测样本中的待测物浓度。

背景技术

免疫层析技术是一种基于抗原抗体特异性反应的检测方法，具有检测速度快、特异性好、操作简单和费用低等优点，相比于其它方法更能满足现场大批量检测的需求，因此近年来发展迅猛，被广泛应用于食品安全、医学检验和环境污染物监测等领域。其中胶体金免疫层析试纸条是应用最广泛的一种免疫层析产品，但其灵敏度较差且易受基质干扰。因此近年来的免疫层析技术主要有三个发展方向：一是采用免疫磁分离富集技术从复杂基质中分离浓缩目标物以避免样品基质的干扰；二是通过信号放大系统(如生物素-链霉亲和素系统等)以提高免疫层析方法的灵敏度；三是采用新型标记物(如荧光微球)，提高信号输出或转变信号输出类型，以达到提高灵敏度的目的。

纳米酶是一类具有酶催化性质的纳米材料，例如贵金属纳米材料、金属氧化物和碳基材料等。相比于传统生物酶，其具备超高的稳定性及酶催化活性，因而广泛应用于临床诊断、生物成像及生物传感器领域。经典的金属纳米酶往往以单一金属组成，例如铂纳米酶和钯纳米酶等，之后又发展了一系列的以碳基材料作为载体的铂碳、钯碳等。近期研究发现，基于双金属协同效应，可大大提高纳米酶的催化活性。

基质效应是影响实际检测准确性的重要因素。磁分离技术是一种通过免疫磁珠捕获目标物，在外加磁场下磁分离后再分散于一定体积的PBS中的样本前处理方法。通过该技术可以同时达到减弱基质效应和富集目标物的目的。

基于上述情况，发明人通过一锅法合成了一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶(Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt)作为探针，应用于医学检验和食品安全快速检测等领域并提高试纸条稳定性和检测灵敏度。目前，尚未有将Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt作为探针应用于免疫层析法中的相关报道。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt的快检新方法。

本发明的另一个目的是提供预固定Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体离心管的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

本发明提供了一种基于聚多巴胺介导的磁性双金属纳米酶Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt的快检新方法，它包括预固定Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体离心管的制备和免疫层析试纸条的制备。其中，所述离心管固定有Fe₃O₄@PDA@Pd/Pt标记抗体复合物，该离心管的制备方法包括如下步骤：