[发明专利]人白细胞介素2-聚乙二醇偶联物及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 202011197646.5 | 申请日： | 2020-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN112279906B | 公开（公告）日： | 2022-09-20 |
| 发明（设计）人： | 陈龙飞;应跃斌;祝静静;杨金纬;巩尊洋;衡新;丁文;宫丽颖;靳婷;夏钢;梁学军 | 申请（专利权）人： | 浙江新码生物医药有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/55 | 分类号： | C07K14/55;A61K38/20;A61K47/60;A61P35/00;A61P35/02;A61P37/04 |
| 代理公司： | 北京信诺创成知识产权代理有限公司 11728 | 代理人： | 吕鹏云;尹吉伟 |
| 地址： | 312366 浙江省绍兴市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 白细胞 聚乙二醇 偶联物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种人白细胞介素2-聚乙二醇偶联物，其包含含有一个非天然氨基酸的重组人白细胞介素2和偶联在所述非天然氨基酸上的PEG；
其中，所述非天然氨基酸的位置选自对应于SEQ ID NO:2的L40、M46和L63中的一个位点；
所述重组人白细胞介素2为SEQ ID NO:3所示的蛋白；
所述非天然氨基酸为Nε-2-叠氮乙氧羰基-L-赖氨酸，结构式如下：
2.根据权利要求1所述的人白细胞介素2-聚乙二醇偶联物，其特征在于：所述PEG的分子量为20KD至50KD。
3.根据权利要求1或2所述的人白细胞介素2-聚乙二醇偶联物，其特征在于：所述PEG是通过连接子偶联在所述非天然氨基酸上的，所述连接子为BCN。
4.制备人白细胞介素2-聚乙二醇偶联物的方法，包括如下步骤：通过密码子扩展技术或者化学合成的方式制备含有一个非天然氨基酸的重组人白细胞介素2，将PEG偶联在所述非天然氨基酸上；
其中，所述非天然氨基酸的位置选自对应于SEQ ID NO:2的L40、M46和L63中的一个位点；
所述重组人白细胞介素2为SEQ ID NO:3所示的蛋白；
所述非天然氨基酸为Nε-2-叠氮乙氧羰基-L-赖氨酸，结构式如下：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述密码子扩展技术在大肠杆菌中实现。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述PEG的分子量为20KD至50KD。
7.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述PEG通过Click反应由连接子偶联在所述非天然氨基酸的侧链上，所述连接子为BCN。
8.权利要求1-3任一项所述的人白细胞介素2-聚乙二醇偶联物在制备促进免疫、治疗恶性实体瘤和血液肿瘤和/或扩充CD8+T细胞的药物中的用途。
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