[发明专利]一种合成On-DNA叠氮化合物的方法

说明书

本发明涉及一种DNA编码化合物库构建中通过一步反应将On‑DNA氨基化合物原位转化为On‑DNA叠氮化合物的方法。本方法加入的试剂种类少，收率高，产物单一，后处理简单，能够在DNA编码化合物库合成中大规模地引入叠氮作为合成模块，且适合多孔板进行的DNA编码化合物库的合成操作。

技术领域

本发明属于编码化合物库技术领域，具体涉及一种由On-DNA氨基化合物在铜试剂和叠氮试剂存在下，得到On-DNA叠氮化合物的方法。

背景技术

在药物研发，尤其是新药研发中，针对生物靶标的高通量筛选是快速获得先导化合物的主要手段之一。然而，基于单个分子的传统高通量筛选所需时间长、设备投入巨大、库化合物数量有限(数百万)，且化合物库的建成需要数十年的积累，限制了先导化合物的发现效率与可能性。近年来出现的DNA编码化合物库技术(WO2005058479、WO2018166532、CN103882532)，结合了组合化学和分子生物学技术，在分子水平上将每个化合物加上一个DNA标签，并能在极短的时间内合成高达亿级的化合物库，成为下一代化合物库筛选技术的趋势，并开始在制药行业广泛应用，产生了诸多积极的效果(Accounts of ChemicalResearch,2014,47,1247-1255)。

DNA编码化合物库通过组合化学快速产生巨型化合物库，并且能高通量地筛选出先导化合物，使得先导化合物的筛选变得前所未有的快捷和高效。构建DNA编码化合物库的挑战之一就是需要在DNA上高收率地合成具有化学多样性的小分子。由于DNA需要在一定的条件下(溶剂、pH、温度、离子浓度)才能维持稳定，同时应用于DNA编码化合物库构建的On-DNA反应还需要有较高的产率。因此DNA上进行的化学反应(简称On-DNA反应)的试剂种类、反应种类、反应条件直接影响到DNA编码化合物库的丰富度和可选择性。从而开发能够与DNA兼容的化学反应也成为目前DNA编码化合物库技术的长期探索和研究方向，也直接影响了DNA编码化合物库的应用及商业价值。

On-DNA叠氮化合物是一类重要的中间体，目前合成On-DNA叠氮化合物的途径主要有两种：一是DNA化合物与含有叠氮基的双官能团试剂通过缩合、还原胺化等化学反应制得On-DNA叠氮化合物，但是这种双官能团试剂较少；二是从DNA芳基卤代化合物出发，与叠氮试剂反应生成On-DNA芳基叠氮化合物，但该反应底物范围仅限于芳基；两种反应很大程度上限制了能够得到的On-DNA叠氮化合物的种类。

因此需要开发一种新的将On-DNA氨基化合物原位转化为On-DNA叠氮化合物的方法，并适用于构建DNA编码化合物库的大批量多孔板操作。

发明内容

本发明公开了一种合成On-DNA叠氮化合物的方法，所述方法是以On-DNA氨基化合物为原料，在铜试剂和叠氮试剂的存在下，在反应溶剂中经一步反应得到On-DNA叠氮化合物；所述On-DNA氨基化合物结构式为DNA-R₁-NH₂，所述On-DNA叠氮化合物的结构式为DNA-R₁-N₃；

其中，结构式中DNA包含由人工修饰的和/或未修饰的核苷酸单体聚合得到的单链或双链的核苷酸链，该核苷酸链通过一个或多个化学键或基团与化合物中剩余部分相连，所述DNA的长度为10～200bp。

R₁选自分子量1000以下与DNA和氨基氮原子直接相连的基团或者不存在。