[发明专利]一种高效纯化分离抗体的方法

权利要求书

1.一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将聚酰胺切片并由双螺杆挤出造粒，将制得的粒料经由纺丝机上的星型喷丝板挤出纺丝，制得异形纤维；

(2)将上述制得的异形纤维进行分散制得质量浓度为5-8％的分散液，将分散液转移至反应器内，滴加硅源、正丁醇以及稀盐酸的混合液，搅拌水解处理，继续加入3-缩水甘油基氧基丙基三甲氧基硅烷、无水乙醇，氮气气氛下继续搅拌反应，反应结束后，过滤，将过滤得到的沉淀干燥制得改性异形纤维填料；

(3)将上述制得的改性异形纤维填料分散在去离子水中制得质量浓度为0.15-0.25％的悬浮液，然后将悬浮液转移至层析柱内，然后干燥，制得改性异形纤维柱；

(4)首先采用缓冲溶液对装载有改性异形纤维柱的层析柱进行平衡预处理，然后将待纯化抗体溶液加载到上述层析柱内，继续采用缓冲溶液对层析柱进行洗涤，最后采用洗脱液对洗涤后的层析柱进行洗脱，并收集洗脱液；洗脱后的层析柱进行后处理再重复利用。

2.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述异形纤维的横截面为正五角星，长度为2-5μm，比表面积为3-5m²/g。

3.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述硅源为正硅酸乙酯；所述稀盐酸的浓度为0.1mol/L；所述正硅酸乙酯、正丁醇、稀盐酸的体积比为2：(3-4)：(1-2)。

4.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述异形纤维、正硅酸乙酯、3-缩水甘油基氧基丙基三甲氧基硅烷、无水乙醇的质量比为5：(1-2)：0.001：2。

5.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌水解处理的条件为：首先在常温条件、500-600rpm下搅拌处理20-40min，然后于60-70℃、1000-2000rpm下搅拌处理2-5h。

6.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述搅拌反应的温度为30-35℃，反应时间为1-2h。

7.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(4)中，平衡预处理以及洗涤层析柱时材料的缓冲溶液为pH为5.0的50mmol/LMES与20mmol/L氯化钠的混合溶液。

8.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述待纯化抗体溶液加载到层析柱时的体积流速为0.55-1.05ml/L。

9.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述洗脱液为pH为2.5、浓度为100mmol/L的甘氨酸溶液。

10.根据权利要求1所述的一种高效纯化分离抗体的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述洗脱后的层析柱的后处理具体为：将洗脱后的层析柱采用pH为3.0的乙酸溶液进行洗涤，然后采用1mol/L的氢氧化钠溶液进行洗涤，最后采用pH6.0的Tris溶液洗涤处理。