[发明专利]苦参碱类生物碱及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种苦参碱类生物碱及其制备方法和应用,苦参碱类生物碱包括新的化合物1～化合物12，还提供了苦参碱类生物碱的制备方法，从山豆根种子中提取出总生物碱后，再分别经多次不同的流动相洗脱提取分离获得，并验证了该苦参碱类生物碱在预防、治疗TMV和杀虫上具有显著的作用。

技术领域

本发明涉及一种农作物的农药技术领域，特别是一种苦参碱类生物碱及其制备方法和应用。

背景技术

病毒病是农作物的一类重要病害，因其危害大、难防治，俗有“植物癌症”之称。病毒病的发生不仅可引起农作物产量、质量下降，种质退化，引起直接经济损失，还可导致误用和滥用农药引起的农药残留超标等农产品质量安全问题。烟草花叶病毒(Tobaccomosaic virus，TMV)是最早被发现的病毒，也是目前研究最为深入的一种典型植物病毒，它寄主范围广，可侵染茄科、十字花科、藜科和苋科等36科350余种植物，包括烟草、番茄、马铃薯、辣椒、黄瓜等经济作物。由该病毒引起的烟草花叶病毒病是一种系统侵染性病害，在全世界主要烟草产区均有分布。全球每年因烟草花叶病毒造成的经济损失可达1亿多美元。TMV在我国烟草产区中已被列为主要发生病害，烤烟产业损失严重，该病在云南的田间株发病率一般5％～20％，幼苗期或大田期感染损失可达30％～50％，甚至个别田块可高达90％～100％，造成绝收，烟农的经济损失惨重。

现有技术中对TMV的防治主要采用喷施抗植物病毒的化学药剂、种植抗病品种等措施，但都不能很好地解决TMV的感染问题。对于抗植物病毒的化学药剂，目前我国登记的抗植物病毒的化学药剂抗植物病毒只有24种，其中单剂仅11种，大部分均为复配制剂。使用的大部分化学药剂虽然能抑制或减少TMV病毒在植物体内的增殖，但不能根除病毒，甚至有些化学药剂会对烟叶产生药害和残留；而抗病品种也因为资源少且易出现抗性缺失等问题而收效不高。迄今为止，仍没有发现能够彻底根除或有效防治TMV的化学农药或措施。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种苦参碱类生物碱及其制备方法和应用。本发明从山豆根种子提取到一种新的苦参碱类生物碱，经药效试验证明具有有效防治TMV和杀虫的特点。

本发明的技术方案：苦参碱类生物碱，所述苦参碱类生物碱包括以下化学结构的化合物1～化合物12：

前述的苦参碱类生物碱中，所述苦参碱型生物碱是从山豆根种子中提取分离获得或通过人工合成获得。

上述的苦参碱类生物碱的制备方法，包括以下步骤：

(1)取干燥的山豆根种子以甲醇回流提取，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用酸碱处理得总生物碱；

(2)取总生物碱经MCI柱色谱分离，用甲醇:水以体积比为0:100～100:0为流动相进行梯度洗脱，得馏分A、馏分B、馏分C和馏分D；

(3)将馏分A经RP-18柱层析，用甲醇:水以体积比为10:90～100:0为流动相进行梯度洗脱，得A-1、A-2和A-3；

(4)将A-3经甲醇凝胶纯化，再经半制备HPLC纯化，流动相为乙腈-水，体积比为30:70～70:30，得化合物2、化合物3和化合物5；

(5)将馏分B经300～400目硅胶柱层析，用石油醚:丙酮:二乙胺以体积比为100:1:1～1:1:0.02为流动相进行梯度洗脱，得B-1、B-2、B-3和B-4；

(6)将B-2经甲醇凝胶纯化，再经半制备HPLC纯化，流动相为乙腈-水，体积比为30:70～70:30，得化合物4、化合物6、化合物7和化合物8；

(7)将B-3经甲醇凝胶纯化，再通过300～400目硅胶柱层析，用石油醚:丙酮:二乙胺以体积比为50:1:0.1～1:1:0.1为流动相进行梯度洗脱，得化合物1、化合物9和化合物12；