[发明专利]抗体定向标记多聚生物素的方法在审
| 申请号： | 202011212275.3 | 申请日： | 2020-11-03 |
| 公开（公告）号： | CN112326953A | 公开（公告）日： | 2021-02-05 |
| 发明（设计）人： | 夏洪丽;鲁义善;夏立群;汪志文;樊慧敏;程俊;喻大鹏;龙梦;陈文捷 | 申请（专利权）人： | 广东海洋大学深圳研究院;深圳义海生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/532 | 分类号： | G01N33/532;C07K16/00;C07K1/13 |
| 代理公司： | 汕头兴邦华腾专利代理事务所(特殊普通合伙) 44547 | 代理人： | 张树峰 |
| 地址： | 518120 广东省深圳市大*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗体 定向 标记 生物素 方法 | ||
1.一种抗体定向标记多聚生物素的方法，包括：
利用生物素或其衍生物上的羧基与载体的表面的氨基反应，反应结束后去除游离的生物素，然后加入冻干保护剂进行冷冻干燥处理得到生物素多聚体；
利用氧化剂将抗体的Fc段糖链上的邻羟基氧化为醛基，封闭剂封闭反应后，去除非蛋白物质，浓缩，得到醛基化抗体；
使用复溶剂将冷冻干燥保存的生物素多聚体溶解，然后加入醛基化抗体进行交联反应一段时间，加入稳定剂，得到生物素化抗体。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述生物素或其衍生物为N-羟基琥珀酰亚胺酯。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述载体为富含伯氨基的大分子化合物。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述载体为牛血清白蛋白(BSA)。
5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述氧化剂为高碘酸钠。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，所用抗体包括Fc段含有多糖链的不同亚型、不同种属的单克隆或多克隆抗体。
7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述冻干保护剂为质量百分比为0.2％-3％的蔗糖、海藻糖、葡萄糖中的一种或几种。
8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述封闭剂为乙二醇。
9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述复溶剂为碱性碳酸盐缓冲液或硼酸盐缓冲液。
10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述稳定剂为硼氢化钠。
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