[发明专利]一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法

权利要求书

1.一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法，其特征在于，以沙棘枝条为原料，采用超声提取法提取沙棘枝条中5-羟色胺并初步纯化后，对样品进行硅烷化处理，利用全扫描模式下特征离子定量GC-MS进行测定；

所述样品的提取制备步骤如下：

(1)将沙棘枝条烘干粉碎后，加入乙醇水溶液室温放置一段时间，使沙棘枝条粉充分浸泡；

(2)将沙棘枝条粉溶液在一定温度下超声提取一定时间，得到超声提取物后过滤，得到沙棘枝条提取液；

(3)将沙棘枝条提取液进行减压浓缩，加入乙酸乙酯和蒸馏水进行萃取，得到沙棘枝条萃取液；

(4)将沙棘枝条萃取液减压浓缩，得到沙棘枝条提取物；

(5)向沙棘枝条提取物加入吡啶溶解，再加入六甲基二硅胺烷和三甲基氯硅烷进行衍生化处理后，离心，取上清液，得到最终沙棘枝条样品；

所述GC-MS的色谱条件：采用型号为0.25mm*30m*0.25μm的Rtx-5MS毛细管色谱柱进行检测；载气为高纯氦气，流速为0.8mL/min，分流比为25:1，进样口温度为280℃；质谱接口温度为280℃，电离方式为电子轰击源，离子能量70eV，离子源温度200℃；升温程序：初温180℃，保持2min，以每分钟6℃升到200℃，保持6min，以每分钟25℃升到280℃，保持16min；监测方式选取全扫描模式，质核比33-500，通过选择离子定量；

所述全扫描模式下选择的特征离子：5-羟色胺硅烷化物质用于定量的特征离子为m/z248。

2.根据权利要求1所述的一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法，其特征在于，采用外标法，分别吸取5-羟色胺标准品溶液和样品注入GC-MS，以峰面积计算相应样品中5-羟色胺的含量。

3.根据权利要求1所述的一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述沙棘枝条与乙醇水溶液体积比值为1:100-1:200，所述沙棘枝条质量单位为克，所述乙醇水溶液体积分数为70-90％，所述室温放置一段时间为8-12小时；

步骤(2)中超声提取次数为两次，超声温度为60-70℃，超声时间为40-60分钟；

步骤(3)、(4)中所述减压浓缩的条件为40-45℃，0.05MPa～0.1MPa；

步骤(5)中衍生化具体为：加入1mL吡啶溶解沙棘枝条提取物，超声5min使其溶解，置于冰水浴中，依次加入0.4mL六甲基二硅胺烷、0.2mL三甲基氯硅烷，使溶液总体积达到1.6mL，20℃静置30min；离心具体操作为8000rpm离心10min，取上清液用于GC-MS分析。