[发明专利]一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法

说明书

本发明公开了一种沙棘枝条中5‑羟色胺的检测方法。具体包括以下步骤：以沙棘枝条为原料，采用超声提取法提取沙棘枝条中5‑羟色胺并初步纯化后，对样品进行硅烷化处理，利用全扫描模式下特征离子定量气相色谱质谱联用技术(GC‑MS)进行测定。本发明的一种沙棘枝条中5‑羟色胺的检测方法具有检测方法灵敏度高、定量准确及成本低廉等特点，为快速、准确检测沙棘枝条中5‑羟色胺提供了方法，对沙棘资源的开发利用具有指导作用。

技术领域

本发明涉及沙棘枝条中5-羟色胺检测技术方法的领域，具体涉及一种利用柱前衍生化特征离子定量气相色谱质谱联用技术检测沙棘枝条中5-羟色胺的方法。

背景技术

5-羟色胺(5-HT)，又名血清素(serotonin)，是一种单胺类神经递质，由色氨酸合成，并且是体内合成褪黑素的前体物质。其分子式为C₁₀H₁₂N₂O。5-HT可与酸作用生成结晶盐，其盐酸盐熔点167-168℃；苦味酸盐熔点185-189℃。5-HT在动物体内存在于中枢和外周神经系统中，其中肠嗜铬细胞合成和储存的5-HT占体内总量的90％，仅有5％在中枢系统分泌。同时也有报道称，5-HT在20科42种植物中存在，主要在果实、种子和营养器官中积累。

5-羟色胺参与人体内许多生理活动的调节，如情绪行为、睡眠、血压、体温、摄食和肠道功能等方面调节，同时，也有助于造血、免疫调节和胚胎发育，这些功能的实现发现与体内不同类型的5-HT受体有关。5-HT也参与植物中许多生理变化的调控，如植物开花、形态建成、保护和适应环境变化。

沙棘作为药食同源植物，于1977年被列入《中国药典》。沙棘以其独特的生物学、生态学等特征，受到人们的广泛关注。沙棘除具有水土保持、减少泥沙和绿化沙漠的生态学价值外，其果实、叶片等含有丰富的维生素、多糖、甾醇、类胡萝卜素、酚类化合物以及脂肪酸等生物活性成分。但沙棘的相关产品和研究多集中于沙棘果实，沙棘叶片和枝条则通常作为废料被处理，造成资源浪费。近年来有研究表明，沙棘中含有单胺类神经递质——5-羟色胺。

目前，对沙棘枝条中5-羟色胺的研究主要集中在提取条件的优化，对于沙棘枝条中5-羟色胺的检测技术方法研究鲜有报道。且在开发利用沙棘枝条中5-羟色胺之前，需要对目标成分进行检测。因此，开发一种具有高灵敏度、准确定量、快速检测的测试方法，在有效提高工作效率和对沙棘枝条的综合利用和深度开发等方面有指导意义。本发明利用柱前衍生化特征离子定量气相色谱质谱联用技术检测沙棘枝条中的5-羟色胺，具有高灵敏度、定量准确、检测速度快等优点，并且相较于常用的液相色谱质谱联用技术成本更为低廉，更适合应用于实际中。

发明内容

本发明旨在提供一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法，能够快速检测、准确定量，用于解决上述技术问题。

本发明是通过如下技术方案实现的：一种沙棘枝条中5-羟色胺的检测方法，其特征在于，以沙棘枝条为原料，采用超声提取法提取沙棘枝条中5-羟色胺并初步纯化后，对样品进行硅烷化处理，利用全扫描模式下特征离子定量气相色谱质谱联用技术(GC-MS)进行测定。

本发明中，优选的，采用Rtx-5MS(0.25mmx30mx0.25μm)毛细管色谱柱进行检测；载气为高纯氦气，流速为0.8mL/min，分流比为25:1，进样口温度为280℃；质谱接口温度为280℃，电离方式为电子轰击源(EI)，离子能量70eV，离子源温度200℃。

本发明中，优选的，GC-MS的升温程序：初温180℃，保持2min，以每分钟6℃升到200℃，保持6min，以每分钟25℃升到280℃，保持16min。监测方式选取全扫描模式(FullScan)，质核比33-500，通过选择离子定量，5-羟色胺硅烷化物质用于定量的特征离子为m/z248。

本发明中，优选的，采用外标法，分别吸取5-羟色胺标准品溶液和样品注入气相色谱质谱联用仪，以峰面积计算相应样品中5-羟色胺的含量。