[发明专利]特发性肺纤维化疾病血液诊断标志物CBR1及其在制备诊断或预后工具中的应用

说明书

本发明公开了一种一种特发性肺纤维化疾病血液诊断标志物CBR1及其在制备诊断或预后工具中的应用，该工具是通过检测血液中的CBR1基因及其表达产物来实现检测特发性肺纤维化疾病的目的。本发明通过蛋白组学筛选在特发性肺纤维化患者和正常人中存在差异表达的蛋白，后经QPCR和ELISA验证证明CBR1在mRNA和蛋白两个水平上均为特发性肺纤维化患者血液的含量比正常人的低。据此可以制备诊断特发性肺纤维化疾病的工具，该工具可在临床上广泛应用。

技术领域

本发明属于医学诊断标志物及工具技术领域，具体涉及一种特发性肺纤维化疾病血液诊断标志物CBR1及其在制备诊断或预后工具中的应用。

背景技术

特发性肺纤维化是最常见的特发性间质性肺炎，是一种未知病因的慢性进行性致死性肺疾病。其病理学特点为肺实质破坏、肺泡上皮细胞表型显著变化、细胞外基质的沉积以及成纤维细胞异常增殖与积累。目前一般认为肺纤维化是遗传和环境风险因素相互作用的结果，其中反复的局部微损伤作用于衰老的肺泡上皮组织起主要作用。微损伤引起异常的上皮-成纤维细胞交互，诱导分泌细胞外基质的肌成纤维细胞形成，导致细胞外基质积累和肺间质重塑。

特发性肺纤维化的发病率在欧洲和北美约为每年2.8-18/10万，在亚洲和南美约为每年0.5-4.2/10万；患病率约为10-60/10万，据此估计患病人群美国有13万，欧洲有30万，东亚有64万，全球3百万；男性患病率明显高于女性(约1.5-1.7:1)，并且随着年龄显著增高；确诊中位年龄为65岁；中位生存期约为2-4年。越来越多的证据表明，在肺纤维化的发生发展过程中，不仅广泛存在着个体间异质性(inter-heterogeneity)和个体内组织细胞的异质性(intra-heterogeneity)，而且还广泛存在着个体在细胞和分子等各种层次的动态变化。肺纤维化的病因不明确、早期诊断易混淆，目前临床上诊断特发性肺纤维化的手段为HRCT和肺组织活检，迫切需要更高效、稳定、早期无创的手段来预警或诊断肺纤维化。

CBR1(羰基还原酶)是NADPH依赖的氧化还原酶，广泛存在于人体各组织。CBR1能够代谢大量内源性和外源性的羰基物质(如醌类、抗肿瘤药等)，起到解毒和代谢药物的作用。研究表明，CBR1能失活氧化应激产生的脂肪醛，故对氧化应激起到保护作用，同时对神经退行性病变和凋亡也有益处。

发明内容

本发明的目的是提供了一种特发性肺纤维化疾病血液诊断标志物CBR1及其在制备诊断或预后工具中的应用，该工具是通过检测血液中的CBR1基因及其表达产物来实现检测特发性肺纤维化疾病的目的。本发明通过蛋白组学筛选在特发性肺纤维化患者和正常人中存在差异表达的蛋白，后经QPCR和ELISA验证证明CBR1在mRNA和蛋白两个水平上均为特发性肺纤维化患者血液的含量比正常人的低。据此可以制备诊断特发性肺纤维化疾病的工具，该工具可在临床上广泛应用。

本发明为实现上述目的采用如下技术方案，特发性肺纤维化疾病血液诊断标志物CBR1，其特征在于该血液诊断标志物为CBR1基因表达产物，CBR1基因的编码序列包括以下任意一种DNA分子：

(1)序列表中SEQ ID NO.1所示的DNA序列；

(2)在严格条件下与(1)限定的DNA序列杂交且编码相同功能蛋白质的DNA序列；

(3)与(1)或(2)限定的DNA序列具有70％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列。

优选的，所述CBR1基因表达产物包括CBR1蛋白、CBR1蛋白的功能等同物以及CBR1蛋白的部分肽，其中CBR1蛋白的部分肽含有与特发性肺纤维化相关的功能域；CBR1蛋白的功能等同物包括CBR1蛋白保守性变异蛋白质，或其活性片段，或其活性衍生物，等位变异体、天然突变体、诱导突变体、在高或低的严紧条件下能与CBR1的DNA杂交的DNA所编码的蛋白质。

优选的，所述CBR1蛋白是具有下列氨基酸序列的蛋白质：