[发明专利]一种检测食品样品中的黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的方法有效
申请号: | 202011219883.7 | 申请日: | 2020-11-05 |
公开(公告)号: | CN112461803B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 云雯;陈红;吴虹;熊政委 | 申请(专利权)人: | 重庆工商大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;C12N15/11 |
代理公司: | 南京中律知识产权代理事务所(普通合伙) 32341 | 代理人: | 沈振涛 |
地址: | 404100 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 食品 样品 中的 黄曲霉 毒素 b1 曲霉 方法 | ||
1.一种检测食品样品中的黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的方法,包括以下步骤:
(1)双DNA镊子纳米机器的制备
在10mM Tris-HCl缓冲液中以1:1的摩尔比混合DNA序列1-6以制备双DNA镊子纳米机器,其中,DNA序列1-6的5’-3’的序列为:
1:FAM-TATATA-GTCCTATCTATGATGGCCCCTTTGTAGACTCAGGAT-AATATT-BHQ3;
2:Cy5-TGCCCA-ATGACACATCACTAGGCCCCGTTGGAGCGACATTAG-TCCGAT-DABCYL;
3:CTAATGTCGCTCCAACAACCATCATAGATAGGAC;
4:ATCCTGAGTCTACAAATACCTAGTGATGTGTCAT;
5:GATCGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCATCGGACA-TATATA;
6:AATATT-GTTGGGCACGTGTTGTCTCTCTGTGTCTCGTGCCCTTCGCTAGGCCCAC;
(2)一步同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A:
将待检测样品添加到步骤(1)制备的双DNA镊子纳米机器溶液中,检测混合后的溶液的荧光光谱,用标准曲线法计算样品中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的浓度;
其中,步骤(1)中,双DNA镊子纳米机器溶液在90℃下孵育5分钟,然后缓慢冷却至25℃,以形成特定的双DNA镊子纳米机器。
2.如权利要求1所述方法,其中,步骤(1)中,Tris-HCl缓冲液pH值为7.5,含有0.3mMKCl。
3.如权利要求1或2所述方法,其中,步骤(1)中,制备的双DNA镊子纳米机器最终浓度为0.5μM。
4.如权利要求3所述方法,步骤(2)中,将待检测样品添加到步骤(1)制备的双DNA镊子纳米机器溶液中之后,在室温下孵育30分钟。
5.如权利要求4所述方法,其中,步骤(2)中,对于486nm激发的羧基荧光素荧光,在505nm至600nm检测混合溶液的荧光光谱,对于640nm激发的吲哚-5-菁荧光,在650nm至750nm检测混合溶液的荧光光谱。
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