[发明专利]标记猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗有效
申请号: | 202011220361.9 | 申请日: | 2020-11-04 |
公开(公告)号: | CN112375126B | 公开(公告)日: | 2022-07-29 |
发明(设计)人: | 贺笋;李俊辉;王遵宝;李延涛;程兰玲;刘宏;郑侃;王雨朦 | 申请(专利权)人: | 天康生物制药有限公司 |
主分类号: | C07K14/18 | 分类号: | C07K14/18;C12N15/40;C12N7/01;A61K39/187;A61P31/14;G01N33/569 |
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地址: | 830000 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市新疆*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 标记 猪瘟 病毒 e2 蛋白 重组 杆状病毒 疫苗 | ||
1.一种标记猪瘟病毒重组E2蛋白,其特征在于,所述标记重组E2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述标记猪瘟病毒重组E2蛋白的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.与权利要求2所述核酸分子相关的生物材料,其特征在于,包括如下任一项:
(a)表达盒,含有权利要求2所述的核酸分子;
(b)重组载体,含有权利要求2所述的核酸分子或(a)中表达盒;
(c)重组真核细胞,含有权利要求2所述的核酸分子、(a)中表达盒或(b)中重组载体。
4.一种表达权利要求1所述的标记猪瘟病毒重组E2蛋白的重组杆状病毒,其特征在于,该重组杆状病毒含有权利要求2中的核酸分子;
所述重组杆状病毒的保藏号为CCTCC NO:V202045。
5.权利要求4所述的重组杆状病毒在制备猪瘟病毒疫苗的应用。
6.权利要求1所述的标记猪瘟病毒重组E2蛋白的制备方法,其特征在于,将权利要求4所述的重组杆状病毒转染昆虫细胞,经培养表达得到所述标记猪瘟病毒重组E2蛋白;
所述昆虫细胞为Sf-9细胞;
所述培养表达的工艺包括:以MOI为2接种病毒,生物反应器的溶氧设定为40-50%,温度设定为26-28℃,转速设定为40-120rpm,培养90-110小时后收获上清。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述培养表达后还包括蛋白纯化的步骤。
8.一种标记猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗,其特征在于,包括佐剂和权利要求1所述的标记猪瘟病毒重组E2蛋白;
所述佐剂包括ISA201VG 、ISA563VG或 ISA660VG,所述佐剂和标记猪瘟病毒重组E2蛋白的质量比为1:0.5-1.5。
9.权利要求8所述的标记猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗的制备方法,其特征在于,由权利要求4所述的重组杆状病毒生产制备得到。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,将重组杆状病毒转染昆虫细胞Sf-9细胞,经培养表达得到标记猪瘟病毒重组E2蛋白,与佐剂乳化得到;
所述佐剂包括ISA201VG 、ISA563VG或 ISA660VG;
所述佐剂和标记猪瘟病毒重组E2蛋白的质量比为1:0.5-1.5。
11.根据权利要求10所述的制备方法,其特征在于,所述培养表达的工艺包括:以MOI为2接种病毒,生物反应器的溶氧设定为40-50%,温度设定为26-28℃,转速设定为40-120rpm,培养90-110小时后收获上清。
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