[发明专利]一株铜绿假单胞菌及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 202011222579.8 | 申请日： | 2020-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN114438000A | 公开（公告）日： | 2022-05-06 |
| 发明（设计）人： | 张稳;王竞辉;黄真真;杨付伟;姜西娟;石森;孔令晓;黎源 | 申请（专利权）人： | 万华化学（四川）有限公司;万华化学集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/52;C12N15/78;C12P19/44;C12R1/385 |
| 代理公司： | 北京信诺创成知识产权代理有限公司 11728 | 代理人： | 吕鹏云;陈悦军 |
| 地址： | 620031 四川省眉山市东坡*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 铜绿 假单胞菌 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一株铜绿假单胞菌重组菌，其过表达NAD+合成酶。
2.根据权利要求1所述的铜绿假单胞菌重组菌，其特征在于：所述NAD+合成酶为如下a)或b)所示的蛋白质：
a)SEQ ID NO:4所示的蛋白质；
b)将SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。
3.根据权利要求1或2所述的铜绿假单胞菌重组菌，其特征在于：所述过表达NAD+合成酶是通过在出发菌株中过表达nadE基因实现的；
优选地，所述nadE基因为如下1)或2)或3)所示的基因：
1)SEQ ID NO:3所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1或2中所述的NAD+合成酶的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1或2中所述的NAD+合成酶的DNA分子。
4.根据权利要求3所述的铜绿假单胞菌重组菌，其特征在于：所述出发菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)KT1115，其保藏编号为CCTCC M2016686。
5.权利要求1-4任一项所述的铜绿假单胞菌重组菌的构建方法，包括在出发菌株中过表达NAD+合成酶。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述NAD+合成酶为如下a)或b)所示的蛋白质：
a)SEQ ID NO:4所示的蛋白质；
b)将SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述过表达NAD+合成酶是通过在出发菌株中过表达nadE基因实现的；
优选地，所述nadE基因为如下1)或2)或3)所示的基因：
1)SEQ ID NO:3所示的DNA分子；
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求5或6中所述的NAD+合成酶的DNA分子；
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求5或6中所述的NAD+合成酶的DNA分子。
8.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其特征在于：所述出发菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)KT1115，其保藏编号为CCTCC M2016686。
9.一种制备鼠李糖脂的方法，包括在能使权利要求1-4任一项所述的铜绿假单胞菌重组菌合成鼠李糖脂的条件下发酵培养所述铜绿假单胞菌重组菌。
10.权利要求1-4任一项所述的铜绿假单胞菌重组菌在制备鼠李糖脂中的应用。
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