[发明专利]从竹叶原料同步制备水溶性和油溶性竹叶抗氧化物的方法

权利要求书

1.从竹叶原料同步制备水溶性和油溶性竹叶抗氧化物的方法，其特征是包括以下步骤：

(1)醇提

将含水量≤20％的竹叶作为原料放入密封的浸提罐中，按照1kg/8～12L的料液比，加入体积浓度为28～32％的醇-水溶液，于40～50℃进行醇提；

醇提时间为12～24hr，然后过滤，所得滤液浓缩；直至浓缩获得固形物含量为(5±0.5)％的浓缩液Ⅰ，或直至浓缩获得固形物含量为(20±1)％的竹叶浸膏；

(2)膜分离

将步骤(1)所得的浓缩液Ⅰ直接进行膜分离；或者将步骤(1)所得的竹叶浸膏加水稀释至固形物含量为(5±0.5)％，得浓缩液Ⅱ，将浓缩液Ⅱ进行膜分离：

将浓缩液Ⅰ/浓缩液Ⅱ的pH值调至6～6.5后，过超滤设备，从而去除大分子杂质，得到超滤透过液；将超滤透过液pH值调回至5～5.5，过纳滤装置，从而除去小分子杂质，取纳滤截留液作为竹叶酚性部位；

超滤的截留分子量为5,000～500,000D；

纳滤的截留分子量为200～1,000D；

(3)色谱制备

从竹叶酚性部位出发，采用反相高效液相制备系统同步得到AOB-w和AOB-o；

包括以下步骤：

①选用反向填料，流动相为甲醇和纯净水，上样竹叶酚性部位；先用纯净水洗脱(10±2)分钟，再用甲醇/纯净水＝1/3(v/v)等梯度洗脱；流速为1～1000mL/min；

②根据馏分的极性进行合并：

将极性相同的洗脱液合并，从而分别得到馏分1和馏分2；将馏分1浓缩、干燥，即为水溶性竹叶抗氧化物(AOB-w)；馏分2浓缩或进一步干燥后即为油溶性竹叶抗氧化物(AOB-o)。

2.根据权利要求1所述的从竹叶原料同步制备水溶性和油溶性竹叶抗氧化物的方法，其特征是所述步骤(3)中，

柱色谱的反向填料为C18硅胶色谱填料；先用纯净水洗脱10分钟，再用甲醇/纯净水＝1/3等梯度洗脱60分钟；流速为70～160mL/min；

按照洗脱时间，分别收集不同馏分：第20～52分钟为馏分1，第53～70分钟为馏分2。

3.根据权利要求1或2所述的从竹叶原料同步制备水溶性和油溶性竹叶抗氧化物的方法，其特征是所述步骤(1)中：

醇提过程中，每1～3hr设置一次超声或微波的辅助提取，所述辅助提取的时间为20～40分钟，辅助提取时设置循环，从而促使竹叶中的有效成分充分释放出来；其余时间为静置提取。

4.根据权利要求3所述的从 竹叶原料同步制备水溶性和油溶性竹叶抗氧化物的方法，其特征是所述步骤(1)中：选用体积浓度30％的甲醇-水溶液。