[发明专利]一种高纯度依诺肝素钠的制备方法

说明书

本发明具体涉及一种高纯度依诺肝素钠的制备方法。现有的依诺肝素钠制备方法汇总，以肝素钠和苄索氯铵为原料，以氯化钠为中性反应介质，通过微波固相合成方法制备得到肝素季铵盐，再通过碱解聚、以酸中和、醇沉淀,精制、脱色,脱水干燥，得到依诺肝素钠成品。基于上述制备方法得到的依诺肝素钠粗品中往往还伴随季铵盐残留。本发明提供了一种高纯度依诺肝素钠的制备方法，将依诺肝素粗品溶液首先经超滤过膜去除季铵盐离子，再经过乙醇沉淀静置获取纯品。该制备方法工艺更加简便，相比以往的粗品纯化方法显著节约试剂、缩短工艺周期。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种高纯度依诺肝素钠的制备方法。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

依诺肝素钠是一种低分子肝素钠盐，主要用于预防静脉血栓栓塞性疾病(预防静脉内血栓形成)，特别是预防与骨科或普外手术有关的血栓形成；治疗已形成的深静脉栓塞，伴或不伴有肺栓塞；与阿司匹林同用，治疗不稳定性心绞痛及非Q波心梗；用于血液透析体外循环中，防止血栓形成等。

依诺肝素钠通过对猪肠黏膜肝素的苄基酯衍生物进行碱解聚而获得，其基本步骤为：以猪黏膜肝素为起始原料，经肝素季铵盐制备、肝素苄酯制备、对肝素苄酯进行碱解聚，以酸中和、醇沉淀，精制、脱色，脱水干燥，得到依诺肝素钠成品。其中，在酸中和、醇沉淀后得到的依诺肝素钠中间体，由于依诺肝素钠在反应过程中会有很多杂质产生，这些杂质会对澄清度造成影响，也会带来临床的副作。另外，基于上述方法制备得到的依诺肝素钠粗品中还会伴随季铵盐残留，由于季铵盐具有毒性，是一种潜在的皮肤过敏原，《依诺肝素钠质量》(国家征求意见稿)中规定依诺肝素钠中不得检出季铵盐。以往的纯化方法中，通过氯化钠溶液溶解粗品，将季铵盐进行置换，再通过加醇使依诺肝素钠沉淀从而进行纯化，上述方案通过简单的步骤即可实现季铵盐的去除，缺陷在于该纯化操作需要重复进行氯化钠溶解及乙醇沉淀的步骤，导致生产周期延长，这种重复操作的步骤还会不可避免的引起依诺肝素钠的损失。

发明内容

基于上述现状，发明人认为，针对依诺肝素钠的纯化问题提供一种能够提高澄清度、降低杂质含量进而提高依诺肝素钠质量的制备方法非常必要。因此，本发明的技术目的在于提供一种收率高、安全性高、澄清度好的依诺肝素钠的制备方法。

基于上述技术目的，本发明提供以下技术方案：

本发明第一方面，提供一种高纯度依诺肝素钠的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

将依诺肝素钠粗品加入氯化钠溶液中溶解得到粗品溶液，将粗品溶液过膜超滤，超滤过程中随时补充氯化钠溶液以保持截留区的溶液体积不变，待流出液中检测不到季铵盐后停止超滤；向超滤截留的液体部分加入醇液获取沉淀即为高纯度的依诺肝素钠。

本发明制备方法的反应原理在于，采用高于3.5％(w/v)浓度的氯化钠溶液溶解依诺肝素钠粗品，通过置换反应使已经与依诺肝素钠粗品结合的季铵盐游离出来，然后用超滤膜超滤掉无效价的低分子肝素碎片和其他杂质如季铵盐、硫酸根等。同时在上述盐度的情况下使得依诺肝素钠由线性的立体构象变成球形分子而被超滤膜阻挡截留，这样就使得依诺肝素钠与杂质得到有效分离。此过程以达到了去除季铵盐和其他杂质的目的。

以上一个或多个技术方案的有益效果是：

(1)依诺肝素钠产品的澄清度好：依据上述制备方法得到的依诺肝素钠具有良好的澄清度，不仅能够充分去除季铵盐残留，对于生产过程中产生的其他小分子杂质也能够尽数去除，纯化后的依诺肝素钠产品澄清度良好。

(2)简便易行，并且缩短工艺周期：以往的纯化步骤，往往需要重复多次氯化钠溶解及乙醇沉淀的步骤才能将季铵盐去除完毕，基于本发明提供的方法，无需重复纯化步骤，仅需要一次静置沉淀即可达到生产要求。