[发明专利]一种检测猫冠状病毒的试纸条及其制备方法、试剂盒、检测方法

权利要求书

1.一种检测猫冠状病毒的试纸条，所述试纸条包括底板(1)，所述底板(1)上从左到右依次搭接样品垫层(2)、胶体金垫层(3)、硝酸纤维素膜层(4)和吸水层(5)，其特征在于，所述胶体金垫层(3)上包被有胶体金颗粒标记的猫冠状病毒单克隆抗体和猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体；所述硝酸纤维素膜层(4)上包被有猫冠状病毒单克隆抗体作为T1检测线(41)，还包被有猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体作为T2检测线(42)，以及包被有羊抗鸡IgG作为质控线(43)。

2.如权利要求1所述的检测猫冠状病毒的试纸条，其特征在于，所述胶体金垫层(3)上包被的所述猫冠状病毒单克隆抗体和所述猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体的浓度为15μg/mL～25μg/mL；

T1检测线(41)上所述猫冠状病毒单克隆抗体的浓度为0.6mg/mL～1.2mg/mL；

T2检测线(42)上所述猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体的浓度为0.6mg/mL～1.2mg/mL；

质控线(43)上所述羊抗鸡IgG的浓度为1.0mg/mL～1.5mg/mL。

3.如权利要求1所述的检测猫冠状病毒的试纸条，其特征在于，所述猫冠状病毒单克隆抗体和所述猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体的比例为2:1。

4.如权利要求1所述的检测猫冠状病毒的试纸条，其特征在于，所述胶体金垫层(3)上还包被有胶体金颗粒标记的鸡抗猫IgY抗体。

5.如权利要求4所述的检测猫冠状病毒的试纸条，其特征在于，所述鸡抗猫IgY抗体的浓度为10μg/mL～15μg/mL。

6.如权利要求1所述的检测猫冠状病毒的试纸条，其特征在于，所述硝酸纤维素膜层(4)粘贴到所述底板(1)的中间位置，在所述底板(1)上所述硝酸纤维素膜层(4)的一侧粘贴吸水层(5)，所述硝酸纤维素膜层(4)的另一侧粘贴胶体金垫层(3)及样品垫层(2)，样品垫层(2)一端压住胶体金垫层(3)一端1.0mm～1.5mm，胶体金垫层(3)另一端压住硝酸纤维素膜层(4)一端0.5mm～1mm，吸水层(5)的一端压住硝酸纤维素膜层(4)另一端1.0mm～2.0mm。

7.一种权利要求1-6中任意一项所述的检测猫冠状病毒的试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、胶体金垫层(3)的制备：在胶体金垫上包被胶体金颗粒标记的猫冠状病毒单克隆抗体和猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体；

S2、硝酸纤维素膜层(4)的制备：在硝酸纤维素膜层(4)上包被猫冠状病毒单克隆抗体作为T1检测线(41)，还包被猫传染性腹膜炎病毒多克隆抗体作为T2检测线(42)，以及包被羊抗鸡IgG作为质控线(43)；

S3、样品垫层(2)的制备：首先，配制处理液，含0.5％PEG20000、0.05％～0.2％Tween-20、0.01％～0.05％表面活性剂、0.3％～1.0％封闭剂的100mmol/L、pH9.0的Tris-HCL缓冲液；其次，将所述处理液涂布于玻璃纤维上，得到样品垫层(2)；

S4、试纸条的制备：在底板1上从左到右依次搭接步骤S3中的样品垫层(2)、步骤S1中的胶体金垫层(3)、步骤S2中的硝酸纤维素膜层(4)和吸水层(5)，即得检测猫冠状病毒的试纸条。

8.如权利要求6所述的检测猫冠状病毒的试纸条的制备方法，其特征在于，在所述胶体金垫上同时包被鸡抗猫IgY抗体。

9.一种检测猫冠状病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1-6中任一项所述的检测猫冠状病毒的试纸条、取样拭子和样本稀释液。

10.一种应用权利要求9中所述的试剂盒检测猫冠状病毒的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、将样品置于样品稀释液中，充分混合静置，取上清液为检测液样本；

S2、将检测液样本滴加到试剂盒的样本孔中，静置一段时间，判定结果。