[发明专利]一种检测赭曲霉毒素A的比色生物传感器在审
申请号: | 202011228150.X | 申请日: | 2020-11-06 |
公开(公告)号: | CN112345751A | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
发明(设计)人: | 黄加栋;王业茹;王玉;刘素;李明涵;孙文玉;张曼茹;江龙 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 牛芳 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 曲霉 毒素 比色 生物 传感器 | ||
1.一种检测赭曲霉毒素A的比色生物传感器,其特征在于,包括血红素,TMB显色剂,aptamer、T链、发夹探针HP1、HP2和HP3,其序列如SEQ ID NO: 1-5所示。
2.一种含有如权利要求1所述的比色生物传感器的试剂盒。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包括系列浓度的赭曲霉毒素A标准溶液。
4.一种利用权利要求1所述的比色生物传感器检测赭曲霉毒素A的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)链状发夹探针HP1、HP2和HP3退火形成发卡结构;
(2)T链、aptamer杂交形成拱形探针;
(3)将发夹探针HP1、HP2、HP3、拱形探针、系列浓度的赭曲霉毒素A标准溶液和待测液在缓冲溶液中混合并进行反应,得产物液;
(4)将步骤(3)中产物液加入血红素孵育后再加入TMB显色剂进行显色并检测吸光度值,通过系列浓度赭曲霉毒素A的峰值处吸光度值做标准曲线,计算待测液中赭曲霉毒素A的浓度。
5. 根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述退火步骤为:溶液于95℃保温5 min,在置于0-4℃中退火。
6. 根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述杂交步骤为:溶液于95℃保温5 min,冷却至室温。
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